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目的:观察SC79抑制地塞米松对成骨细胞的细胞损伤作用,并探讨Akt-Nrf2信号通路在抑制作用的机制。方法:1.使用指定浓度梯度(0.1-25μg/mL)的SC79预处理MC3T3-E1细胞、小鼠原代成骨细胞及人的OB-6成骨细胞,处理时间为1小时。然后经1μM的地塞米松处理24小时。MTT法检测上述细胞的存活,LDH释放实验检测细胞死亡;2.使用SC79(10μg/mL)预处理MC3T3-E1细胞、小鼠原代成骨细胞及人的OB-6成骨细胞1小时,然后经1μM的地塞米松处理不同时间。使用Caspase-3、AnnexinV及ELISA实验检测细胞凋亡情况。MMP、线粒体损伤及细胞色素释放实验检测细胞坏死;3.MC3T3-E1成骨细胞经三种不同的Akt抑制剂LY294002、perifosine和MK-2206)预处理30分钟,经SC79(10μg/mL)处理1小时,实验组再经1μM的地塞米松处理。western blot实验检测蛋白表达量。MTT实验及ELISA实验分别检测细胞的存活与凋亡。小鼠原代成骨细胞用SC79(10μg/mL)处理1小时,然后使用浓度为10μM的perifosine处理30分钟;4.shRNA方法敲除及阻断Nrf2,构建Nrf2shRNA及dn-Nrf2稳转细胞。ROS实验检测ROS浓度,RT-qPCR检测mRNA的表达及MTT实验检测细胞活性。结果:1.MTT存活实验结果显示,SC79在1-25mg/mL,可以显著减弱Dex诱导的MC3T3-E1细胞活力。此外,SC79可以抑制Dex诱导的细胞LDH释放。2.SC79显著减弱Dex诱导的胱天蛋白酶-3激活,膜联蛋白V检测比率增加和组蛋白DN凋亡ELISA OD增加。SC79抑制Dex诱导的MC3T3-E1细胞凋亡激活。SC79抑制Dex诱导的MC3T3-E1细胞及原代鼠成骨细胞中MMP降低CyPD-ANT-1复合和细胞色素C释放。SC79减弱Dex诱导的细胞凋亡和程序性坏死。3.western blot实验结果显示Akt抑制剂(LY294002、perifosine和MK-2206)可以阻断SC79诱导的Akt磷酸化。MTT实验及ELISA实验结果显示,Akt抑制剂可以明显减弱SC79抑制dex诱导细胞凋亡的作用。4.实时定量PCR(RT-qPCR)测定证明SC79处理的MC3T3-E1细胞中Nrf2的调控基因(HO-1和NQO-1和GCLC)mRNA表达增加,但是Nrf2 mRNA没有改变。但是,使用Akt抑制剂几乎阻断SC79诱导HO-1的mRNA表达。在Nrf2shRNA及dn-Nrf2稳转细胞中,Nrf2 shRNAs或突变没有影响SC79诱导细胞Akt活化,但是SC79-介导的HO-1 mRNA表达几乎被Nrf2阻断敲低或突变,并且SC79诱导的抗氧化剂活性和细胞保护显著减弱。结论:SC79可以抑制地塞米松诱导成骨细胞的凋亡和程序性坏死,这种作用是通过激活成骨细胞中的Akt下游Nrf2信号进行传导,Nrf2信号激活后发挥抗氧化和细胞保护作用。