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甘蔗是世界主要的能源作物和糖料作物,广西是甘蔗的主产区,年甘蔗糖产量约占全国的70%。然而广西蔗区土壤肥力低,氮肥施用量高,不仅造成高成本还会污染环境。通过接种促生固氮菌而降低氮肥施用量,从而降低甘蔗种植成本,是一种节能环保的有效途径。本研究从甘蔗根际土壤中分离了一批促生假单胞菌,对其16S rRNA基因,nifH固氮基因和抗生素基因进行了克隆测序及鉴定,并通过Rep-PCR指纹图谱分析技术揭示了细菌个体间在遗传上的亲缘关系,根据细菌的促生特性及对甘蔗病原真菌的拮抗作用,筛选出优良菌株CY4和CN11,结合BIOLOG技术,检测了优良菌株的代谢多样性,同时结合GFP标记技术检测了其在甘蔗中的定殖能力,并用该优良菌株接种了两个不同甘蔗品种,证实了其能促进甘蔗的生长,用15N稀释技术证实了其对甘蔗具有联合固氮的能力。主要研究结果如下:1.从甘蔗根际土壤分离到250株根际细菌,筛选得到100株优良促生菌,经16S rDNA序列分析显示,有30个菌株属于假单胞菌属。2.30株假单胞菌均具有多种促生特性,其中26株具有良好的溶解无机磷的能力,20株具有分泌嗜铁素的能力,12株具有分泌氨的能力,13株具有分泌氰化氢的能力,18株能以ACC为唯一氮源生长,IAA分泌量在13.12～312.07μg mL-1(添加色氨酸)和12.92～23.24μg mL-1(不添加色氨酸),固氮酶活性在6.16～108.30μmol C2H2 h-1 mL-1,ACC脱氨酶活性在15.13～77.0μmol mg-1 h-1。真菌拮抗实验表明,14株抗甘蔗黑穗病病原菌,11株抗甘蔗凤梨病病原菌。3.利用PCR技术对30株假单胞菌的nifH基因和抗生素相关基因进行分子检测,结果发现有10株菌株的基因组DNA中能扩增出大小约为360 bp的固氮酶nifH基因,4株能扩增出大小约为1.15 kb的吩嗪-1-羧酸PCA基因,5株能扩增出大小约为786 bp的吡咯菌素PRN基因,9株能扩增出大小约为587bp的氢氰酸HCN基因。4.利用GFP标记技术证实优良菌株CY4和CN11均能在甘蔗组培苗中定殖。采用室内盆栽试验,分别比较了优良促生菌株CY4和CN11接种对不同固氮特性的两个甘显著增加其株高和鲜重,同时也能在一定程度上提高甘蔗内源激素的含量及固氮效率。本试验筛选获得30株具有良好抗病或促生作用的假单胞菌,尤其是促生效果突出的Pseudomonas koreensis CY4和Pseudomonas entomophila CN11,这两株假单胞菌具有研发成为生物菌肥的潜力。