精子特异性乳酸脱氢酶通常由四个C亚基组成,因此又称为乳酸脱氢酶C4(LDHC4),是精子能量代谢的一个关键酶,与精子的生成、代谢、获能等有密切关系。在不育症患者中与精子活力缺陷相关的占82%,直接由于精子活力下降导致不育的占20%。LDHC4是精子发生中特异性表达的抗原,LDHC4基因的缺失或突变可导致LDHC4酶在质和量上发生改变,影响精子的活力,导致男性不育。本研究用LDHC4特异性底物对精子LDHC4进行活性染色,利用DHPLC技术对LDHC4活性染色低下的不育症患者的LDHC4基因进行突变筛查,对DHPLC峰形异常的PCR产物进行序列测定,再用T克隆确证突变的存在,最后设计ARMS在一组正常人群检测筛查到的突变。结果表明,在不明原因不育症患者中活性染色筛选到一组精子LDHC4活性明显下降的患者,占6%以上。在这组患者中,有1名患者的LDHC4基因的PCR产物在DHPLC中呈异常洗脱峰。对这一PCR产物进行序列测定,发现患者LDHC4基因第5外显子的115碱基发生了T→A的杂合改变,该突变使LDHC4基因的178位密码子由原来的TTG(编码亮氨酸)变为TAG(终止密码子),称L178X突变。T克隆实验进一步证实了该无义突变的杂合状态。通过针对L178X突变的ARMS实验,在一组正常人(20例)未检测到该突变。这一杂合突变导致精子发生过程中LDHC4的表达量大大减少,从而影响精子的能量代谢,最终影响其受精能力。本研究在国际上首次在男性不育症患者中发现了LDHC4基因的突变,初步证明了LDHC4基因的突变可导致男性不育的假说。