日粮添加不同水平CLA对育肥绵羊血清脂代谢指标和脂肪组织细胞凋亡的影响

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CLA能够诱导细胞凋亡,并且使动物体内脂肪沉积减少,但并不了解其具体的作用机制。本论文运用动物营养学技术和分子生物学方法,探讨了日粮中添加不同水平CLA对绵羊脂肪组织细胞凋亡的影响,研究其可能存在的作用途径。本试验将18只绵羊随机分为3组,每组6只羊,分别为对照组、1.5%CLA组和3.5%CLA组。试验期75天,其中预饲期15天,正饲期60天。试验分为以下内容:试验一:日粮中添加不同水平的CLA对绵羊血清脂代谢相关生化指标的影响。结果表明,三组之间TC、TG和HDL的含量均无显著差异(P>0.05);与对照组相比,3.5%CLA组中LDL的含量显著降低(P<0.05)。试验二:日粮中添加不同水平的CLA对绵羊脂肪组织细胞凋亡的影响。1)日粮中添加不同水平的CLA对绵羊脂肪组织细胞凋亡形态学和生化特征的影响。结果表明,经TUNEL染色后,两个试验组均出现明显的黄绿色荧光,并且随着CLA浓度的升高,脂肪细胞凋亡特征更加明显。3.5%CLA组经过琼脂糖凝胶电泳后出现了明显的DNA梯状条带,说明细胞发生了凋亡,而其它两组现象并不明显。2)日粮中添加不同水平的CLA对绵羊脂肪组织细胞凋亡相关酶活表达的影响。结果表明,三组之间Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的酶活力均无显著差异(P>0.05)。3)日粮中添加不同水平的CLA对绵羊脂肪组织细胞相关基因表达的影响。结果表明,与对照组相比,1.5%CLA组中Caspase-3和Cyt-C的m RNA表达量显著降低(P<0.05),Bcl-2的m RNA表达量显著升高(P<0.05),Bax的mRNA表达量无显著差异(P>0.05)。与对照组和1.5%CLA组相比,3.5%CLA组中Bax、Caspase-3和Cyt-C的m RNA表达量极显著升高(P<0.01),Bcl-2的mRNA表达量极显著降低(P<0.01)。4)日粮中添加不同水平的CLA对绵羊脂肪组织细胞相关蛋白表达的影响。结果表明,与对照组相比,1.5%CLA组中Caspase-3和Cyt-C的蛋白表达量显著降低(P<0.05),Bax和Bcl-2的蛋白表达量无显著差异(P>0.05)。与对照组和1.5%CLA组相比,3.5%CLA组中Bax、Caspase-3和Cyt-C的蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Bcl-2的蛋白表达量极显著降低(P<0.01)。综上所述,在本试验条件下,日粮中添加3.5%CLA,促进了绵羊脂肪组织细胞的凋亡,且降低了血清中LDL的含量,而对于1.5%CLA的影响有待进一步研究。
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