目的通过用丝线结扎大鼠上颌双侧第一磨牙颈缘部分和丝线结扎大鼠上颌双侧第一磨牙颈缘部分并配合接种牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)以建立实验性大鼠牙周炎模型,并通过观察牙龈颜色、质地、牙齿松动度、影像学检查等观测指标评判牙槽骨的破坏情况以显示牙周炎动物模型建立成功。通过HE染色观察牙槽骨损失程度的病理状态,免疫组织化学染色观察在牙槽骨发生病理性吸收时起重要作用的双向信号传导因子ephrin B2、Eph B4的表达情况,为牙周病的预防和治疗提供新的思路。方法1、4周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,随机分为3组(每组8只):空白对照组、大鼠上颌双侧第一磨牙丝线结扎组、大鼠上颌双侧第一磨牙丝线结扎并配合接种P.g组,接种的P.g的浓度为1x10~9CFU/ml。所有大鼠均给与普通鼠粮和随意饮水,环境温度25℃左右。2、在建模的4w、8w时探查三组大鼠牙龈颜色质地及牙齿松动度情况,然后分批每组各处死4只,剥离出上颌骨并进行影像学检查,分析测量双侧第一磨牙牙槽骨丢失量。3、颊舌向分离出第一磨牙,4%的多聚甲醛溶液常规固定,脱水,包埋、切片。制成牙周炎大鼠的第一磨牙病理切片,HE染色进行病理分析牙周炎炎症症情况和骨吸收情况。4、免疫组织化学染色分析信号分子Eph B4受体及ephrin B2配体在大鼠牙周炎模型牙槽骨中表达情况。结果1、对照组上颌第一磨牙牙龈外观无异常现象,探诊未出血,牙槽骨未见吸收;4周时结扎组和结扎+P.g组牙龈见有轻度水肿,丝线上附着有食物残渣及软垢,探诊时均有出血现象,可探及牙周袋;8周时结扎组和结扎+P.g组牙龈暗红,牙龈乳头出现糜烂的现象,牙齿周围附着较多的食物残渣,触及宜出血,出血程度重于4周,牙齿松动明显。2、结扎组和结扎+P.g组在4周、8周时上颌第一磨牙牙槽骨均有不同程度的吸收;结扎组和结扎+P.g组在8周时牙槽骨的吸收达根中1/3;结扎组和结扎+P.g组在在同一时间周数时,结扎+P.g组的骨丢失量均大于结扎组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组同一处理因素下,8周的骨吸收量均大于4周时的骨吸收量,差异具有统计学意义(P<0.05)。3、HE染色后,光镜下观察对照组上颌第一磨牙的牙周组织形态结构未见明显异常,结合上皮位于釉牙质界,牙周膜纤维排列规则,结缔组织未见炎症细胞。结扎组和结扎+P.g组在第4周、8周牙周膜纤维均排列紊乱,结缔组织内见炎性细胞浸润,骨小梁结构逐渐稀疏,在牙槽骨边缘出现大量活化的破骨细胞,可见有牙槽骨组织破坏,骨髓腔内也可见大量的巨噬细胞。4、免疫组化结果显示:Eph B4在正常的牙槽骨组织的边缘区域表达较多,尤其是在成骨细胞中,在破骨细胞中Eph B4仅有少量的表达;ephrin B2在牙周膜中有广泛表达,成骨细胞中表达不多。在牙槽骨吸收的过程中,ephrin B2则在破骨细胞尤其是牙槽骨吸收区有相对高的表达量。Eph B4:在三组中,结扎组和结扎+P.g组蛋白表达均随着造模时间的增加均增加,差异具有统计学意义(P<0.05);在相同的时间周数,结扎组和结扎+P.g组的表达与对照组相比增加,差异具有统计学意义(P<0.05),且结扎+P.g组较结扎组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。ephrin B2:在三组中,结扎组和结扎+P.g组蛋白的表达随着造模时间的增加均有所增加。在相同的时间周数,结扎组和结扎+P.g组的表达较对照组有所增加,且结扎+P.g组的表达较结扎组高,但差异均不具有统计学意义(P>0.05)。结论采用大鼠上颌第一磨牙结扎和结扎并配合接种P.g,成功建立实验性大鼠牙周炎模型。免疫组化的结果显示Eph B4升高,表明正向通路被激活,促进了成骨分化。ephrin B2有小幅度的增加,但差异均不具有统计学意义,结果显示逆向通路的破骨细胞抑制作用不明显。