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研究背景胃癌是全世界最常见的消化道恶性肿瘤之一,胃癌在全世界范围内死亡率在所有恶性肿瘤中排名第三。一项大样本普查资料表明,我国胃癌死亡率在所有恶性肿瘤中排名第三。胃癌的发生受多因素影响,但其具体发病机制仍不明确。进展期胃癌预后不佳,目前治疗上仍存在严峻挑战,近期几项针对胃癌的靶向治疗试验均以失败告终。因此寻找新的胃癌早期诊断分子生物学指标和潜在治疗靶点,对改善胃癌预后和提高患者生存率具有重要意义。ROR全名维甲酸相关孤核受体,是核受体大家族的亚家族之一,由RORa、 RORb、RORc三大亚型构成。ROR在哺乳动物的发育、免疫、生物节律、细胞代谢等方面均起到了关键作用,其中对生物节律的调节起作用的主要是RORb。另外,ROR家族与肿瘤也有密不可分的联系,主要体现在RORc缺陷增加淋巴瘤的易感性。截至目前,我们检索发现有一篇报道涉及RORb与肿瘤相关性,该研究表明与正常乳房组织相比,RORb在乳腺癌旁组织中表达抑制。而目前关于胃癌与RORb相关性的研究暂无报道。实验目的本研究拟在先前大肠癌与RORb的研究基础上,分析RORb在胃癌中的表达情况,研究RORb过表达对SGC胃癌细胞成瘤能力的影响；探讨RORb在胃癌中表达的分子机制,为胃癌的靶向治疗提供基础。实验方法1、Real-time RCR检测34例胃癌临床样本的RORb mRNA表达。2、通过将RORb-pReceiver重组质粒瞬时转染入胃癌SGC7901细胞系,并用G418(遗传霉素)筛选耐药细胞,并用有限稀释克隆法筛选出稳定过表达RORb蛋白,经western blot验证目的蛋白表达强阳性后,注射入裸鼠皮下,构建裸鼠成瘤模型。研究过表达RORb的胃癌细胞成瘤能力是否下降。3、基因芯片分析RORb过表达胃癌细胞的基因表达谱。4、基因芯片的结果用DAVID软件进行GO分析。实验结果5、RORb在胃癌组织中表达下调Real-time PCR发现mRNA在胃癌组织较癌旁组织、正常组织表达均显著下调。6、RORb过表达胃癌细胞在裸鼠体内瘤体平均体积小于对照组胃癌细胞瘤体平均体积。7、经Human Genome U133 Plus 2.0 Array基因表达谱芯片分析,RORb过表达组和对照组之间有460个差异表达基因,其中表达上调的有177个基因,表达下调的有283个基因,其中凋亡促进因子BCL2L11 (BCL2L11)表达上调了5.08倍,5号染色体开放阅读框36 (C5orf36)表达下调了4.23倍。8、GO分析提示差异基因的分子功能主要集中在细胞结合、转移酶活性、酶活性调节上。结论胃癌组织中RORb mRNA显著下调；RORb过表达对裸鼠体内成瘤起抑制作用,生物信息学分析提示RORb与肿瘤形成过程密切相关,并其可能通过调控细胞周期、细胞增殖和分化等作用于肿瘤形成过程。