本论文共分为三部分内容,1.作者在Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞模型上,观察6首开心散类方对其存活率的影响,并比较6首开心散类方的作用；2.研究6首开心散类方对D-半乳糖联合亚硝酸钠所致AD模型小鼠学习记忆能力的改善作用,并观察它们对各组小鼠海马中BDNF、Tau蛋白、p-Tau蛋白、Aβ、Ach、AchE及血清NT-proBNP的影响,获得作用较佳的类方,并对其配伍比例进行初步探讨；3.基于1.和2.的研究结果,在快速老化小鼠(SAM) AD模型上,进一步研究较佳类方的药理作用及机制。目的：本论文研究6首开心散类方的抗AD的药理作用,筛选出作用较佳的类方,初步分析其配伍比例不同而药理作用各有侧重,并对其作用机制进行初步探索,为深入研究开心散对AD的药理作用提供依据。方法：第一部分研究采用20 μmol·L-1 Aβ1-42作用于SH-SY5Y细胞培养24h建立阿尔茨海默病细胞模型,给予各开心散类方高、中、低剂量(3.570g·kg-1、1.785g·kg-1和0.892gkg-1), MTT法检测不同剂量的6个开心散类方对Aβ1-42诱导的SY5Y细胞存活率的影响。第二部分研究选用昆明小鼠,腹腔注射D-半乳糖和亚硝酸钠,时间为8周,建立阿尔茨海默小鼠模型后,给与6首开心散类方(剂量分别为3.5709·kg-1·、1.7859·kg-1和0.892g·kg-1)和阳性药(石杉碱甲0.05mg·kg-1),连续灌胃35天后,采用Morris水迷宫评价各组动物学习记忆能力,Western blotting方法检测各组小鼠海马中BDNF的含量,Elisa方法检测各组小鼠海马中Tau蛋白、p-Tau蛋白、Aβ、Ach、AchE及血清中NT-proBNP的含量。第三部分研究基于前期1.和2.的的研究,我们认为《千金要方·卷十四》之开心散和《医门方》之开心丸在阿尔兹海默症的细胞模型和动物模型上都表现出了较之其他类方更好的作用,本部分在快速老化模型小鼠上,进一步观察这两个类方对快速老化模型小鼠学习记忆能力的改善作用,以及对快速老化模型小鼠海马和皮层中的BDNF、Tau蛋白、p-Tau蛋白、AP、Ach、AchE及血清NT-proBNP的影响,以验证与1.和2.部分得到的研究结果,并增加了动物皮层中各指标的研究。快速老化模型小鼠给与两个开心散类方(3.570g·kg-1、1.785g·kg-1和0.892g·kg-1)和阳性药(石杉碱甲0.05mg·kg-1),连续灌胃35天后,采用Morris水迷宫评价各组动物的学习记忆能力,Western blotting方法检测各组小鼠海马和皮层中BDNF的含量,Elisa方法检测各组小鼠海马和皮层中Tau蛋白、p-Tau蛋白、Aβ、Ach、AchE及血清中NT-proBNP的含量。结果：第一部分结果显示,与模型组相比,《千金要方·卷十四》之开心散中剂量的细胞存活率明显提高,具有显著性差异(P<0.01)；《千金要方·卷十四》之开心散高、低剂量组,《医门方》之开心丸高、中、低剂量,《医心方》之开心散中剂量,《古今录验》之定志丸高、中剂量,《备急千金药方》之定志小丸中剂量的细胞存活率提高,具有统计学意义(P<0.05)。综合各类方来看,《千金要方·卷十四》之开心散高、中、低剂量组和《医门方》之开心丸高、中、低剂量组与模型组相比均能提高阿尔茨海默病细胞模型的存活率,而其他类方对细胞存活率的改善不明显。第二部分结果显示,《千金要方·卷十四》之开心散高、中剂量均能显著改善AD模型小鼠学习记忆能力,明显升高其海马中BDNF、Ach含量,显著降低其海马中AchE、Aβ、Tau蛋白,p-Tau蛋白以及血清中NT-proBNP含量,药理作用最为全面,并根据权重分析得出其在Tau蛋白方面作用较突出；《医门方》之开心丸多数剂量显著优化了评价学习记忆能力的各项指标,明显升高AD模型小鼠海马中BDNF. Ach含量,显著降低AD模型小鼠海马中Aβ、Tau蛋白、p-Tau蛋白含量及AchE舌性,明显降低AD模型小鼠血清中NT-proBNP含量,药理作用次之,并根据权重分析得出其在Tau蛋白方面作用也较突出；《医心方》之开心散、《备急千金要方》之定志小丸和《古今录验》之定志丸对AD模型小鼠各指标的影响各有侧重,少数剂量显著优化了评价学习记忆能力的各项指标,明显升高AD模型小鼠海马中BDNF. Ach含量,显著降低AD模型小鼠海马中Aβ、Tau蛋白、p-Tau蛋白含量及AchE活性,明显降低AD模型小鼠血清中NT-proBNP含量,药理作用并不十分显著；而《千金翼》之补心汤的高、中、低剂量均基本未见其对阿尔茨海默症模型动物的影响。结果提示我们,《千金要方·卷十四》之开心散对阿尔茨海默病模型小鼠的作用最为全面,《医门方》之开心丸次之,且这两个类方在Tau蛋白方面的作用较为突出。根据配伍比例的初步分析,药理作用最为全面的《千金要方·卷十四》之开心散重用茯苓和石菖蒲两味药材,提示我们,茯苓和石菖蒲可能是其发挥治疗AD作用的主要因素之一。第三部分结果显示,在海马中,《千金要方》之开心散和《医门方》之开心丸均能有效升高模型动物海马中BDNF的含量,升高Ach含量,降低AchE活性,降低Aβ含量,降低Tau蛋白和p-Tau蛋白含量,作用较为明显；同时,《千金要方》之开心散可有效升高皮层中的Ach含量,降低AchE活性,降低Ap含量,降低Tau蛋白和p-Tau蛋白含量；《医门方》之开心丸组也可有效升高Ach含量,降低AchE活性,降低Tau蛋白和p-Tau蛋白含量,但对皮层中各指标的作用较之海马中要稍差。结果提示我们,《千金要方》之开心散和《医门方》之开心丸在快速老化小鼠模型上,也得到了与1.和2.部分相同的研究结果,此外,在快速老化小鼠模型上,这两个类方对海马的作用较之对皮层作用的影响要更大一些。结论：本研究论文在阿尔兹海默症的细胞和动物模型上,评价了6首开心散类方的药理作用和机制,发现《千金要方》之开心散和《医门方》之开心丸对阿尔茨海默病模型的药理作用优于其他开心散类方,其作用机制主要与抑制Tau蛋白的过度磷酸化、升高Ach含量和降低AchE活性密切相关,而与升高BDNF含量、降低Ap含量和血清中NT-proBNP含量方面相关性较弱。药材组成相同、配比不同的6首类方中,《千金要方》之开心散和《医门方》之开心丸中茯苓和石菖蒲的配比增加或减少可能是影响其发挥治疗AD的因素之一。提示这两个类方具有很好的抗阿尔兹海默症的潜力。