miR-146a作为早期乳腺浸润性导管癌分子标志物的临床预后研究

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目的:检测早期乳腺浸润性导管癌microRNA-146a(miR-146a)的表达,探讨早期乳腺浸润性导管癌mi R-146a表达与临床特征及预后的关系,评价其诊断及预后价值。方法:(1)采用原位杂交技术检测289例早期乳腺浸润性导管癌miR-146a表达,免疫组化技术检测部分病理指标不全病例的ER表达、PR表达、HER-2表达,探讨早期乳腺浸润性导管癌miR-146a表达与临床病理特征及分子亚型的差异性,应用Kaplan-Meier法计算累计无瘤生存时间,Log-rank检验进行中位无瘤生存时间分析,对早期乳腺浸润性导管癌患者预后行多因素分析。(2)q RT-PCR检测60例早期乳腺浸润性导管癌组织与匹配的癌旁正常组织mi R-146a表达水平,分析不同分子亚型的早期乳腺浸润性导管癌与癌旁正常组织miR-146a表达差异,验证癌组织miR-146a表达与临床病理指标之间的相关性。(3)纳入30例早期乳腺浸润性导管癌患者,30名健康志愿者以及20例乳腺纤维腺瘤患者,分别采集外周血并提取血清,qRT-PCR定量检测80例研究对象血清mi R-146a表达水平,比较三者间miR-146a表达差异,分析早期乳腺浸润性导管癌患者血清mi R-146a表达水平与临床病理指标之间的关系,评估血清miR-146a对早期乳腺浸润性导管癌的诊断价值。结果:(1)(1)原位杂交技术检测289例早期乳腺浸润性导管癌miR-146a表达,miR-146a阳性表达率为66.1%。早期乳腺浸润性导管癌miR-146a表达与淋巴结转移、复发转移、ER、PR、HER-2表达状态相关(P<0.05),miR-146a表达在发病年龄、月经状态、肿块大小各组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)在289例早期乳腺浸润性导管癌患者中,miR-146a阳性表达与阴性表达患者之间中位无瘤生存时间差异具有统计学意义(P<0.05),相对miR-146a阴性表达,miR-146a阳性表达患者预后更好。(3)界定分子亚型,不同分子亚型的早期乳腺浸润性导管癌miR-146a表达存在差异(P<0.05)。(4)对106例Luminal A型患者癌组织mi R-146a表达进行生存分析:miR-146a阳性表达患者中位无瘤生存时间较阴性表达患者中位无瘤生存时间长,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)对68例Luminal B型患者进行生存分析:miR-146a阳性表达与阴性表达患者中位无瘤生存时间无显著差异(P>0.05)。(6)对45例HER-2过表达型患者进行生存分析:miR-146a阳性表达与阴性表达患者中位无瘤生存时间无显著差异(P>0.05)。(7)对70例Basal-like型患者进行生存分析:mi R-146a阳性表达患者中位无瘤生存时间显著高于mi R-146a阴性表达者,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。(8)多因素生存分析表明:ER表达(P=0.049)、放疗情况(P=0.028)及miR-146a表达(P=0.041)为早期乳腺浸润性导管癌患者的预后影响因素,miR-146a阴性表达(HR=1.876)、ER阴性表达(HR=1.909)及未行放疗(HR=1.688)为预后危险因素。(2)(1)本研究60例早期乳腺浸润性导管癌与匹配的癌旁正常组织miR-146a相对表达水平分别为1.494±1.341和2.127±1.881,两者差异有统计学意义(P<0.05),miR-146a在早期乳腺浸润性导管癌组织中表达水平下调。(2)界定分子亚型,miR-146a在癌组织与匹配的癌旁正常组织间呈现差异表达,HER-2过表达型患者癌组织miR-146a表达水平较癌旁正常组织下调,Basal-like型患者癌组织mi R-146a表达水平较癌旁正常组织上调。(3)在60例早期乳腺浸润性导管癌组织中,miR-146a表达水平与淋巴结转移、HER-2表达状态相关(P<0.05)。(3)(1)血清miR-146a数据显示:与健康者及乳腺纤维腺瘤患者相比,早期乳腺浸润性导管癌患者血清miR-146a表达水平显著上调(P<0.05),乳腺纤维腺瘤患者与健康者血清miR-146a表达水平无显著差异(P>0.05)。(2)早期乳腺浸润性导管癌患者血清miR-146a表达水平在年龄、月经状态、ER、PR、HER-2表达、肿块大小等各组间差异均无统计学意义(P>0.05),血清mi R-146a表达水平与淋巴结转移相关(P<0.05)。(3)血清miR-146a在诊断早期乳腺浸润性导管癌ROC曲线下面积为0.731,(95%CI:0.604-0.858)、灵敏度、特异度及准确度分别为93.50%、44.40%和79.70%,血清mi R-146a对早期乳腺浸润性导管癌患者具有较高的诊断效能。结论:(1)早期乳腺浸润性导管癌miR-146a表达与淋巴结转移、复发转移及HER-2表达有关,miR-146a阳性表达提示良好的预后。(2)miR-146a在不同分子亚型的早期乳腺浸润性导管癌组织中存在表达差异,相对癌旁正常组织,HER-2过表达型癌组织miR-146a表达水平下调,而Basal-like型癌组织miR-146a表达水平上调,提示mi R-146a在不同分子亚型的早期乳腺浸润性导管癌中生物学行为可能存在差异。(3)早期乳腺浸润性导管癌患者与健康者血清mi R-146a存在差异表达,早期乳腺浸润性导管癌患者血清miR-146a表达水平明显上调,血清miR-146a表达水平与淋巴结转移有关。(4)miR-146a在早期乳腺浸润性导管癌中发挥抑癌作用,并涉及复杂的调控机制,miR-146a可作为早期乳腺浸润性导管癌患者诊断及预后的候选分子标志物。
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