【摘 要】
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本研究从自然发酵的豆粕中筛选出高产蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的多种微生物。菌株鉴定后,通过拮抗实验和安全性试验复筛更加适合的菌种组合。以粗蛋白含量和大豆肽含量为评价标准,优化单菌发酵条件;筛选最优发酵菌株组合,对复合发酵工艺条件进行优化,并对豆粕固态发酵前后的营养物质含量和抗营养因子变化进行分析。结果显示:从自然发酵豆粕中分离纯化出22株菌,其中包括17株芽孢杆菌,3株酵母和2株霉菌。通过产蛋白酶,
【基金项目】
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湖北省技术创新专项（2018ABA103）
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本研究从自然发酵的豆粕中筛选出高产蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的多种微生物。菌株鉴定后,通过拮抗实验和安全性试验复筛更加适合的菌种组合。以粗蛋白含量和大豆肽含量为评价标准,优化单菌发酵条件;筛选最优发酵菌株组合,对复合发酵工艺条件进行优化,并对豆粕固态发酵前后的营养物质含量和抗营养因子变化进行分析。结果显示:从自然发酵豆粕中分离纯化出22株菌,其中包括17株芽孢杆菌,3株酵母和2株霉菌。通过产蛋白酶,淀粉酶和纤维素酶活力的测定,芽孢杆菌B-8产蛋白酶,淀粉酶和纤维素酶活力均高于其他菌株。酵母Y-3产酶活力也强于其余两株酵母菌。霉菌M-1和M-2均有良好的产酶活力。菌株经鉴定,芽孢杆菌B-8为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis B-8）,酵母Y-3为酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae Y-3）,霉菌M-1为米根霉（Rhizopus oryzae M-1）,霉菌M-2为产黄青霉（Penicillium chrysogenum M-2）。4株菌为安全菌株且不相互抑制,可用于固态发酵试验。通过单菌发酵试验,得到最优单菌发酵条件为:接种量10%,料水比1.0:1.4,发酵温度32℃,发酵时间72h。在最优单菌发酵条件下,枯草芽孢杆菌发酵豆粕大豆肽含量最高（P<0.05）;米根霉发酵豆粕粗蛋白含量最高（P<0.05）。对比多菌株组合发酵结果,确定枯草芽孢杆菌B-8和米根霉M-1为最优发酵菌株组合。复合发酵最佳发酵工艺条件为:枯草芽孢杆菌和米根霉同时接入到豆粕中,两菌株接种比例2:1,发酵总接种量10%,发酵温度40℃,料水比1.0:1.4,发酵时间96 h。豆粕经复合发酵后,发酵产物中大豆肽、粗蛋白、粗灰分、粗脂肪含量较发酵前均得到显著提升（P<0.05）,水分含量显著下降（P<0.05）,大分子蛋白质基本降解为10 ku以下的小分子,大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量显著低于未发酵豆粕（P<0.05）。表明豆粕经复合发酵后,营养成分显著增加,抗营养因子含量显著降低,营养品质得到改善。
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