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目的:探究B10细胞在放射性肺纤维化进程中的作用及其是否通过上皮-间质转化（EMT）及肌成纤维细胞的转化过程促进放射性肺纤维化的发展。方法:1.根据照射后不同时间将C57BL/6小鼠随机分为5组:未照射（IR 0d）、照射后2天（IR 2d）、14天（IR 14d）、3个月（IR 3m）和5个月（IR 5m）共5个组。应用18Gy 6MV-X线单次照射全肺建立放射性肺纤维化模型。使用苏木精-伊红（HE）染色法、马松（Masson）染色法对肺组织的病理学改变进行观察,利用免疫荧光法观察肺组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况,评价放射性肺纤维化模型的构建成功与否。2.采用流式细胞技术检测B10细胞在照射后不同时间的放射性肺纤维化小鼠模型中肺组织、脾脏中的数目变化,研究B10细胞在放射性肺纤维化过程中的浸润情况。3.在体外实验中,通过流式分选技术获取B10细胞,将B10细胞与MLE-12细胞（小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞）共培养,利用Western-Blot、免疫荧光和实时荧光定量PCR（q PCR）技术来检测MLE-12细胞的上皮标志物（E-cadherin）、间质标志物（N-cadherin）的蛋白表达和间质细胞标记因子（Fibronectin 1、Vimentin、MMP9）等的m RNA表达水平,探究B10细胞是否促进Ⅱ型肺泡上皮细胞发生EMT。4.在体外实验中,利用B10细胞与NIH 3T3细胞（小鼠胚胎成纤维细胞）共培养,使用Western-Blot、免疫荧光和实时荧光定量PCR（q PCR）技术检测共培养组的肌成纤维细胞标志物（α-SMA）的表达情况和锌指转录因子（ZEB1）、转录因子Snail 1的m RNA表达水平,探究B10细胞是否促进成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化。5.应用18Gy 6MV-X电离辐射建立放射性肺纤维化的小鼠模型,将C57BL/6小鼠随机分为2组:（1）照射+生理盐水（NS）组;（2）照射+Anti-CD22组。Anti-CD22抗体用于消减放射小鼠体内B10细胞。利用HE染色、Masson染色观察小鼠肺组织的病理学改变和纤维化严重程度,流式细胞技术及免疫荧光检测B10细胞在放射性肺纤维化模型中的数量及分泌情况变化,肺组织免疫荧光法观察上皮、间质细胞标志物及肌成纤维细胞标志物蛋白的表达情况,验证B10细胞可通过EMT及诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化促进放射性肺纤维化进程。结果:1.经过单次18Gy胸部照射后,成功建立放射性肺纤维化的小鼠模型。在HE染色、Masson染色的结果中显示,照射后早期（IR 2d、IR 14d）小鼠肺部有明显炎性渗出,晚期肺泡结构明显破坏,间质中大量胶原纤维填充;和未照射组相比,在照射后的肺组织各时间点的HE病理学评分具有统计学差异（F=18.562,P<0.001）,且在IR 5m时,Masson染色肺胶原沉积显著（t（?）=6.006,P<0.001）。免疫荧光结果发现照射组α-SMA表达显著上调（t=8.022,P=0.001）。2.在放射性肺纤维化小鼠模型中观察到,早期脾脏及肺组织中B10细胞浸润明显。流式细胞计数结果显示:与未照射组相比,早期（IR 2d、IR 14d）脾脏（F=22.230,P<0.001）及肺组织（F=7.485,P=0.004）中B10细胞占全部脾/肺细胞比值显著增多,差异均具有显著统计学意义,而照射后3个月时B10细胞较IR 2d/14d浸润减少;且肺组织B10细胞免疫荧光结果示,IR 2d、IR 14d B10细胞比值均较IR0d显著增加（F=9.099,P=0.015）。3.在体外实验中验证了B10细胞可促进MLE-12细胞发生EMT改变。免疫荧光、Western-Blot结果证实,与对照组相比,B10细胞与MLE-12细胞共培养组上皮标志物（E-cadherin）明显下调（t=6.972,P=0.002）,而间质标志物（N-cadherin）明显上调（t=4.548,P=0.010）;q PCR结果显示B10细胞共培养组较对照组Fibronectin1（t=7.575,P=0.002）、MMP9（t=10.180,P=0.002）及Vimentin（t=10.360,P=0.001）等的m RNA表达升高。同样,B10细胞上清液与MLE-12细胞共培养结果显示,与对照组相比,B10细胞上清与MLE-12细胞共培养组的E-cadherin蛋白表达下调（t=13.917,P<0.001）,N-cadherin蛋白表达上调（t=6.246,P=0.003）,且Fibronectin（t=6.715,P=0.0026）、及Vimentin（t=7.88,P=0.001）等的m RNA表达上调。4.同时,在体外实验中证实了B10细胞可促进成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化。免疫荧光、Western-Blot结果发现:相较于对照组,B10细胞与NIH 3T3细胞共培养组的α-SMA表达上调（t=8.287,P=0.001）,且q PCR结果显示B10细胞共培养组较对照组Snail（t=10.26,P=0.001）、ZEB1（t=7.383,P=0.002）的m RNA表达水平明显升高,两组差异有统计学意义;同样,免疫荧光结果显示,B10细胞上清与NIH 3T3细胞共培养组与对照组相比α-SMA表达上调,且q PCR结果显示Snail（t=30.350,P<0.001）、ZEB1（t=3.429,P=0.027）的m RNA表达水平明显升高。5.进一步利用Anti-CD22抗体消减放射小鼠体内B10细胞,发现可减轻放射性肺纤维化。HE、Masson染色结果发现:与单纯照射组相比,Anti-CD22组照射后各时间点的炎性渗出减少,病理学评分显著下调（F=11.250,P=0.002）;肺间质胶原纤维填充减少（F=11.250,P<0.001）。脾脏与肺流式细胞计数结果及肺免疫荧光结果表明照射后各时间点,Anti-CD22组B10细胞显著低于单纯照射组,且具有统计学差异。免疫荧光结果发现照射后5个月,Anti-CD22组较单纯照射组α-SMA表达下调（P=0.007）,E-cadherin蛋白表达上调（P=0.009）;照射后3个月,Vimentin蛋白表达水平下调（P=0.027）。结论:B10细胞可以通过促进II型肺泡上皮细胞的EMT及诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化参与促进放射性肺纤维化的进程。