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作为caspase-3/7的首选肽类底物,Ac-DEVD-pNA和Ac-DEVD-AMC被广泛应用于细胞生物学、化学生物学和药用化学领域中。目前,Ac-DEVD-pNA主要用于检测细胞中caspase-3和caspase-7的活性,也用于鉴定和评估caspase-3和caspase-7抑制剂和procaspase-3/7的小分子激活剂。其具体作用机理是：Caspase-3或caspase-7催化Ac-DEVD-pNA的水解,继而释放出发色基团对硝基苯胺,通过对对硝基苯胺发色强度的检测,相应检测出体内caspase-3或caspase-7的活性大小。本文在目前的多肽合成法的基础上,详细地评价了各种合成路线的优缺点。在综合考虑成本、原子经济性、绿色环保的基础上选用液相多肽合成法合成克级规模的caspase-3/7底物：Ac-DEVD-pNA。主要的合成步骤：(1) Fmoc-Asp(Ot-Bu)-OH与对硝基苯胺反应：由于对硝基苯胺的氨基亲核性较低,故以三氯氧磷为强活化剂在低温条件下反应,柱色谱分离纯化后产率可达74.2%；(2)多肽缩合：以PyBOP为缩合试剂,在室温条件下即可反应迅速,每步缩合产率都在90%以上；(3)氨基脱保护：室温下,在二乙胺的二氯甲烷溶液中脱除氨基保护基Fmoc保护基,反应迅速,脱除彻底,产率可达到90%以上；(4)羧基脱保护：最后,用三氟乙酸对所有羧基脱保护得到目标产物。本论文,合成目标产物的总产率为32%。本文也对合成Ac-DEVD-AMC做了初步探索研究。根据实验室对四唑离子液体基础研究工作,以4-乙基-2-丁基-5-苄基四唑硫酸乙酯离子液体为催化剂高产率的合成了7-氨基-4-甲基香豆素。该离子液体的具体合成路线：(1)利用1,3-偶极环加成反应,以苯乙腈和叠氮钠为原料,水作溶剂,溴化锌为催化剂合成5-苄基四唑,产率可达78%；(2)以1-溴丁烷为丁基化试剂,DBU为碱催化剂,合成2-丁基-5-苄基四唑,产率可达61%；(3)将2-丁基-5-苄基四唑与硫酸二乙酯加入甲苯中回流得到目标离子液体,产率可达74%。本文对各步反应机理进行了讨论,并用核磁共振氢谱和质谱等对产物进行了表征,证实所制备的样品为目标产物。