靶向于软骨的非病毒基因传递系统修复兔软骨缺损的实验研究

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:griffinroar
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的体外构建靶向软骨的携带绿色荧光蛋白的壳聚糖基因传递系统(lowmolecular weight chitosan/nhanced green fluorescent protein LMWC/EGFP);初步探讨LMWC/EGFP基因纳米复合物诱导软骨细胞向缺损软骨表面靶向聚集是否与电荷呈相关性的机制,并观察其在家兔膝关节软骨缺损模型中促进软骨修复的作用。方法制备TGF-β1/LMWC DNA纳米微粒组、TGF-β1/PEI DNA纳米微粒组、对家兔膝关节的软骨细胞进行体外转染操作,借助酶联免疫吸附试验的方式(ELISA)检测0h,1h,6h,1d,2d,3d,5d,7d培养液中生长因子hTGF-β1的含量,以观察该支架的缓释作用;制备家兔膝关节软骨缺损模型,制备TGF-β1/LMWC DNA纳米微粒组作为实验组,TGF-β1/PEI DNA纳米微粒组作为阳性对照组,TGF-β1/裸质粒复合物作为空白对照组,分别携带绿色荧光蛋白,将三组复合物分别植入家兔软骨缺损处,转染缺损处软骨细胞,2月后处死,取膝关节软骨组织行组织病理切片,荧光显微镜观察和II型胶原免疫荧光染色观察复合物聚集现象和软骨细胞生长情况。结果体外转染软骨细胞后实验组和阳性对照组复合物细胞培养液中随着时间的延长TGF-β1浓度逐渐降低,但相应时间点实验组TGF-β1浓度明显高于阳性对照组,说明LMWC基因载体对hTGF-β1有一定的缓释作用;GF-β1/LMWC DNA纳米微粒组,TGF-β1/PEI DNA纳米微粒组,TGF-β1/裸质粒复合物三组复合物转染家兔膝关节软骨缺损后2个月,发现TGF-β1/LMWC DNA纳米微粒组病理切片中软骨细胞和复合物在缺损软骨表面聚集程度明显高于对照组,且TGF-β1/LMWC DNA纳米微粒组荧光倒置显微镜下软骨细胞聚集程度明显高于对照组,免疫荧光显示实验组II型胶原数量也多余其他两组,说明被试验的软骨细胞形成状况显著优于另外两组,这一差别在统计学层面具有价值,即p<0.05。结论TGF-β1/LMWC DNA纳米微粒复合物在体外和体内均可有效诱导软骨细胞生长,且因/LMWC DNA纳米微粒复合物组较TGF-β1/PEI DNA纳米微粒组在兔关节软骨缺损处聚集现象明显增多,故考虑此聚集现象呈电荷相关性。同时,该支架对TGF-β1有一定的缓释作用,可用于修复膝关节软骨缺损。
其他文献
立体匹配作为立体视觉深度感知中的一个研究重点,其主要目的是为了获得准确的三维场景信息。同时,由于立体匹配具有对光照不敏感、在室外环境中更加鲁棒的特点,因此被广泛应
近些年阁楼式住宅占据了我国城市住宅建筑的较大份额,尤其当下的小户型、单身公寓式的顶层阁楼仍然是消费者的选购热门。在有限的住宅空间充分利用阁楼斜屋顶式建筑结构,使其
本文以《孙真人千金方》的动词作为考察对象,把共时的描写和历时的比较相结合,把对《孙真人千金方》动词的系统研究和个案研究相结合,把描写与解释相结合,揭示作为中古汉语向近代
采用两种脱水方式(自然沥干和离心脱水)处理鲜切黄瓜,通过电子鼻技术结合感官和品质分析对鲜切黄瓜贮藏期间的品质变化进行研究。结果表明:鲜切黄瓜在冷藏过程中稍有质量损失
春节是中华民族最隆重、最盛大的传统节日,发红包已成为过节的重要节目。2017鸡年红包大数据显示:除夕当天微信红包收发量为142亿个,相比2016猴年除夕的80.8亿个,增长了76%,特别是被
目的:探讨贵阳市常规体检人群饮食行为对血脂异常的影响。方法:选取健康体检的1838名体检者为研究对象,使用自行设计的调查表收集被调查者的一般情况和饮食行为,清晨空腹采静
介绍枸杞多糖的成分与生理功能,以及枸杞多糖的提取方法,并对枸杞多糖的发展前景进行预测。
目的:建立兔自体静脉移植再狭窄模型,采用形态学观察、免疫组化、TUNEL法、电镜观察以及Western Blot等多种研究手段,研究移植静脉重塑过程中凋亡水平及增殖的时间特性,以期为预
新疆杨届白杨派种群。白杨派一个共同的特性是扦插育苗生根难。原因是在枝杆生长过程中根原基分化数量少.比青杨派和黑杨派少4-5倍。所以,新疆杨扦插育苗的着眼点应放在愈伤组
思想、政治、道德教育为一体的思想政治教育在人类历史上源远流长,思想政治教育伴随着阶级和国家的产生而产生,以不同内容和形式存在于不同社会形态中。在社会主义国家,思想