细胞外基质磷酸糖蛋白在牙齿发育及牙周组织缺损愈合过程中的表达

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目的:细胞外基质磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)是小型N端连接整合糖蛋白(small integrin-binding ligand N-linked glycoprotein,SIBLING)家族成员。该家族成员还包括:骨桥蛋白,骨唾液蛋白,牙基质蛋白1,牙本质唾液磷酸蛋白和釉蛋白。SIBLING家族蛋白在基质钙化、调节成骨细胞及破骨细胞功能方面发挥重要作用。MEPE是一种磷调节因子,对磷酸盐代谢紊乱及各种骨组织疾病的成骨细胞增生及牙周组织生理连接的重建过程中有重要作用。本研究拟通过观察小鼠出生后牙齿连续发育过程中MEPE在牙胚和牙周组织中的表达变化,研究MEPE在小鼠牙齿硬组织及牙周组织形成等方面可能发挥的作用,为进一步研究牙齿发育的分子机制和牙周组织的再生提供理相应的理论依据。通过观察MEPE在牙周组织缺损愈合过程中的组织分布,探讨MEPE在牙周组织再生中的作用,为临床上利用MEPE治疗牙周炎及牙槽骨萎缩、颌骨畸形及颌骨骨折等提供理论依据。方法:不同发育期SPF级BALB/c小鼠(山东大学动物中心提供)88只。戊巴比妥钠腹腔麻醉,新鲜配制4%多聚甲醛循环内固定30分钟,分离双侧下颌骨,4℃下再固定24h,10%EDTA脱钙30-60天,梯度乙醇脱水、石蜡包埋,近远中向5μm连续切片。成年SPF级Wistar大鼠(山东大学动物中心提供)24只。戊巴比妥钠腹腔麻醉后行右侧磨牙区牙槽骨开窗手术(5mm×2mm×1mm),分别于术后14天和28天戊巴比妥钠腹腔麻醉,新鲜配置4%多聚甲醛循环内固定30分钟,分离右侧下颌骨,4℃下再固定24h、10%EDTA脱钙90天,梯度乙醇脱水、石蜡包埋,近远中向5μm连续切片。HE染色观察牙周组织缺损愈合情况。PV免疫组化两步法检测MEPE在牙齿发育及牙周组织缺损愈合过程中各组织的表达。结果:1.MEPE在出生后小鼠牙齿发育过程中的表达:牙胚发育早期,MEPE在成釉细胞、成牙本质细胞及牙髓组织中均有表达。随着牙胚的不断发育,MEPE在上述细胞中的表达逐步减弱;在牙周膜中逐渐表达;在前期牙本质中亦有表达;在成年小鼠牙周膜中弱阳性表达。MEPE在嵌入骨陷窝的成熟成骨细胞中呈现高表达。2.术后14天,术区有部分新生牙槽骨形成,部分牙周纤维附着于根面牙本质上。术后28天,术区完全被新生牙槽骨覆盖,在新生牙槽骨和牙本质之间可见牙周膜和部分牙骨质生成,牙周膜大部分附着于根面上。3.牙周组织缺损愈合过程中,MEPE在缺损区牙槽骨和牙周膜相关细胞中表达。结论:1.细胞外基质磷酸糖蛋白在牙齿硬组织,特别是在牙本质小管形成过程中发挥重要作用。2.细胞外基质磷酸糖蛋白可能在牙周膜的形成以及在维持牙周组织内环境稳定方面起一定作用。3.在牙周缺组织损愈合过程中,细胞外基质磷酸糖蛋白参与牙槽骨以及牙周膜的再生。
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