【摘 要】
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维生素C(Vitamin C,Vc)是人们不能通过自身合成,必须从外界中获得的一类营养物质。其在果蔬中的含量极为丰富,进行适量的补充能够大大提高人体的免疫力。但是,摄入量过多或者过少都会引起机体的病变反应。因此,亟需开发一套快速、准确、灵敏、简单的检测系统。微流控芯片技术(Microfluidics)是在微流控芯片上构建微型实验室,通过控制芯片上的微通道中的液体,实现相应的化学或生物学反应的技术。
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维生素C(Vitamin C,Vc)是人们不能通过自身合成,必须从外界中获得的一类营养物质。其在果蔬中的含量极为丰富,进行适量的补充能够大大提高人体的免疫力。但是,摄入量过多或者过少都会引起机体的病变反应。因此,亟需开发一套快速、准确、灵敏、简单的检测系统。微流控芯片技术(Microfluidics)是在微流控芯片上构建微型实验室,通过控制芯片上的微通道中的液体,实现相应的化学或生物学反应的技术。该技术具备成本低、自动化程度高、制作简单、分析效率高等多种优势而受到了广泛关注。本论文基于微流控芯片技术,建立了果蔬维生素C检测方法,并对所建立方法的准确度进行了验证性实验。本论文的研究内容包括以下三个部分:1.微流控芯片的制备通过激光切割法结合软印刷的方式制备了微流控芯片。实验通过光刻法、3D打印法和激光切割法三种方法对芯片制备模板的形貌分析,确立了采用激光切割法制备芯片模板,达到了时间短,制作简单的目的。采用聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane,PDMS)进行软印刷的方式实现微流控芯片的制备,对三种方法制备的芯片进行形貌分析。最终确立了采用激光切割法结合软印刷的方式制备微流控芯片。实验通过对相关影响因素条件的优化,确立了PDMS(AB胶)比例为10:1、PDMS添加量为30 g、键合时间为5 min的条件下制作出来的芯片状态最好,无气泡产生,芯片的硬度适宜,符合实验所需的要求,能够进行果蔬维生素C含量的检测。2.基于微流控芯片对果蔬维生素C含量检测方法的建立基于微流控芯片,结合比色反应和图像分析技术,建立了微流控芯片对果蔬维生素C含量的检测方法。利用Vc与Fe3+溶液和1,10-菲啰啉溶液发生氧化还原反应原理,结合比色反应的图像分析,实现Vc含量的快速检测。实验对反应条件进行正交优化和方差分析。最终结果为反应液Fe3+浓度为0.025 mol/L、1,10-菲啰啉浓度为0.05 mol/L、样品添加量为90μL、反应时间为2 min,进行验证性实验,工艺条件的优化良好。定量的曲线为在5~40 mg/100g的范围内,其呈现较好的线性关系,线性方程为Y=1.37x+9.55(R2=0.9 903)。实验对芯片性能进行分析,确立了该芯片检出限为5 mg/100g,稳定性良好,保存期为6个月。3.基于微流控芯片对果蔬维生素C含量快速检测的应用通过与样品检测方法进行比对分析,验证本方法检测样品的准确性。实验通过微流控芯片法、滴定法和紫外分合光度法进行样品检测,三种检测结果基本一致,且差异率小于3%,并且通过加标回收实验测定回收率在88.26%~103.94%之间。说明本方法数据可靠,准确度较高。并且与另外两种方法相比,本方法具备操作简单、快速检测等优点,同时适用于实地检测,方便携带。
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