人参是一种名贵的中药材,主要含有人参皂苷、糖类、氨基酸、维生素、蛋白质、多肽、有机酸等物质,其中人参皂苷被认为是主要的活性成分。其药物活性主要表现在抗肿瘤、降血糖、抗氧化等方面,稀有人参皂苷在这方面的效果更加的显著。但稀有人参皂苷在人参植物中含量很少,甚至不存在,故对稀有人参皂苷的活性作用及常见人参皂苷转化为稀有人参皂苷的研究正好是当下学者们研究的焦点和重点。目前常用的人参皂苷体外转化的方法有物理转化法、化学水解法、酶水解法、微生物转化法。物理转化法和化学水解法虽然操作简单但专一性差,转化率低,而且会对环境造成一定的压力。微生物转化法虽具有反应条件温和、反应选择性强、副产物少、后处理简单等特点,但需要进行微生物的培养,实验周期长且操作要求较高。然而酶解法集上述各方法的优点于一身,是转化稀有人参皂苷的不二选择。目前用酶法制备稀有人参皂苷的研究多集中于从自然界中筛选出相应的酶,本论文将以商品化酶制剂作为切入点进行稀有人参皂苷转化的研究,通过水提取的方法得到人参皂苷,采用高效液相色谱法进行人参皂苷的定量分析。对10种糖苷酶制剂(果胶酶、纤维素酶、乳糖酶(β-半乳糖苷酶)、β-葡聚糖苷酶、纤维二糖酶(β-葡萄糖苷酶)、α-淀粉酶、β-淀粉酶、半纤维素酶、葡糖淀粉酶(淀粉葡糖苷酶,糖化酶)、葡糖氧化酶)及1种蛋白酶制剂(胰蛋白酶)进行了人参根酶解法转化效果的研究,以期筛选出高效率转化人参皂苷的商品化酶制剂,得到的主要研究结果如下:1、纤维二糖酶(β-葡萄糖苷酶)、纤维素酶、半纤维素酶有较好的酶解效果。经过β-葡萄糖苷酶酶解,人参根的总皂苷含量提高12.76%,人参皂苷Rb1降低了85.38%,人参皂苷Rh1增加了12.90%;经过半纤维素酶酶解,人参根的总皂苷含量提高10.18%,人参皂苷Rg1提高78.21%,人参皂苷Rb1降低42.11%,人参皂苷Rh1降低20.97%;经过纤维素酶酶解,人参须的总皂苷含量提高8.72%,人参皂苷Rg1提高47.14%,人参皂苷Rb1降低了18.36%,人参皂苷Rh1提高17.72%。此外胰蛋白酶处理人参根也能增加人参皂苷的含量。2、人参根水提后用β-葡萄糖苷酶酶解,所得稀有人参皂苷与不酶解的样品比较含量相差两倍左右。酶解后的Rd皂苷含量(3.56mg/g)约为水提液(0.44mg/g)的10倍。人参皂苷含量的增加因为β-葡萄糖苷酶酶解的作用,而与β-葡萄糖苷酶本身及人参根自身酶和温度无关。3、β-葡萄糖苷酶酶解水提与渣的混合液得到的总皂苷和稀有皂苷含量都多于β-葡萄糖苷酶酶解人参根水提液,因此可判断人参根中的纤维不影响酶解效果。4、5家不同公司的β-葡萄糖苷酶进行酶解优化实验结果表明酶解后得到总人参皂苷含量最高的是:C公司的β-葡萄糖苷酶酶解72h(11.94mg/g);得到稀有人参皂苷含量最高的是:A公司的β-葡萄糖苷酶酶解12h(7.04mg/g);Rb1→Rd转化率最高的是:A公司的β-葡萄糖苷酶酶解12h(142.51%)。5、采用A公司β-葡萄糖苷酶对人参根酶解不同时间(1-72h),结果表明,A公司的β-葡萄糖苷酶酶解人参根12h总皂苷和稀有皂苷含量最高,分别为11.467.04mg/g,7.04mg/g。且Rb1→Rd的转化率相对较高,可达到142.51%。6、研究酶解前保温对人参根总皂苷及稀有皂苷转化等的影响,结果表明保温有助于提高总皂苷、稀有皂苷含量及Rb1→Rd转化率。保温1h再酶解24h所得的总皂苷含量为11.85 mg/g,稀有皂苷含量为7.52 mg/g。而直接酶解24h得到的总皂苷含量为11.20 mg/g,稀有皂苷含量为7.21 mg/g。