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第一部分:miR-34/449在哮喘患儿外周血中的表达及意义目的:探讨miR-34/449在支气管哮喘急性发作期患儿外周血中的表达及其与患儿病情的相关性。方法:临床纳入2015年1月至2017年1月我院收治的支气管哮喘急性发作期患儿48例,设为哮喘组,同时纳入同时期40例健康体检儿童作为对照组。分别采集两组外周血,并进行microRNA-34与microRNA-449水平检测,同时检测血嗜酸性粒细胞计数、IgE、IL-5、IL-13、TNF-α、IFN-γ水平。结果:哮喘组患儿microRNA-34与microRNA-449水平分别为(0.26±0.12)、(0.38±0.07),对照组患儿microRNA-34与microRNA-449水平分别为(0.98±0.19)、(1.03±0.21),差异有显著性(P<0.001)。哮喘患儿嗜酸性粒细胞计数、IgE、IL-5、IL-13、TNF-α、IFN-γ水平分别为(0.45±0.12)×109/L、(169.47±100.58)IU/m L、(16.85±3.31)pg/mL、(57.56±20.89)pg/m L、(15.57±3.07)pg/m L、(65.69±10.31)pg/m L,对照组患儿嗜酸性粒细胞计数、IgE、IL-5、IL-13、TNF-α、IFN-γ水平分别为(0.23±0.09)×109/L、(72.47±32.58)IU/m L、(8.75±1.57)pg/m L、(8.80±9.51)pg/mL、(8.12±1.50)pg/m L、(77.38±9.23)pg/m L,差异有显著性(P<0.05)。结论:支气管哮喘急性发作期患儿外周血中microRNA-34/449水平降低,推测miR-34/449与哮喘发生发展密切相关;提高miR-34/449表达水平是否起到治疗哮喘的作用值得进一步研究。第二部分:表达miR-34/449对哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响及与自噬的相关性目的:研究表达mi R-34/449对哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响及与自噬的相关性,为miR-34/449在哮喘治疗方面的应用奠定基础。方法:18只年龄6-8周雄性BALB/c小鼠,随机化分为哮喘模型组、正常对照组、miR34/449 mimics干预组,每组6只小鼠,以卵蛋白腹腔注射致敏及雾化吸入激发小鼠制备哮喘模型,ELISA法检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中IL-5、IL-6、TNF-α水平,肺组织行HE染色观察肺部炎症细胞浸润情况,RT-PCR检测肺组织miR34/449的表达情况,免疫荧光分析肺组织中TGF-β表达情况,Westernblot检测bFGF、collagen I、collagen III、α-SMA的水平,同时检测自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I、Beclin-1和P62的表达情况,了解过表达miR-34/449对哮喘小鼠气道炎症及气道重塑改善的情况并探讨其机制。结果:哮喘模型组小鼠肺组织炎症细胞浸润明显,以嗜酸性粒细胞为主,BALF中IL-5、IL-6、TNF-α水平、肺组织TGF-β、bFGF、collagen I、collagen III、α-SMA的水平升高,同时自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I、Beclin-1的表达升高。哮喘模型组小鼠肺组织miR34/449的表达低于正常组,miR34/449 mimics干预组miR34/449的表达水平较正常组及哮喘模型组明显升高,差异有显著性(P<0.05)。miR34/449 mimics干预组与哮喘模型组相比,小鼠肺组织炎症细胞浸润明显减轻,BALF中IL-5、IL-6、TNF-α水平、肺组织TGF-β、b FGF、collagen I、collagen III、α-SMA的水平下降,同时自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I、Beclin-1的表达下降,差异有显著性(P<0.05)。结论:哮喘小鼠模型肺组织Mir-34/449表达水平下降,表达Mir-34/449能明显减轻哮喘小鼠气道周围炎症程度,减轻气道重塑,这种作用可能同降低自噬相关蛋白的表达相关。