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第一部分异丙酚对原代海马神经元线粒体功能的影响目的:观察不同浓度和不同孵育时间的异丙酚对原代海马神经元线粒体功能的影响。方法:原代海马神经元体外培养至第7天:（1）浓度依赖性分组:随机分为对照组（C组）,脂肪乳剂组（I组）,异丙酚1μM组（P1组）,异丙酚10μM组(P10组),异丙酚100μM组(P100组)。C组和I组神经元细胞分别用新鲜培养基和脂肪乳剂孵育3 h;P1组、P10组和P100组神经元细胞分别用1μM、10μM和100μM异丙酚孵育3 h。（2）时间依赖性分组:随机分为对照组（C组）,脂肪乳剂组（I组）,异丙酚孵育3 h组（P3组）,异丙酚孵育6 h组（P6组）,异丙酚孵育9 h组（P9组）。C组和I组神经元细胞分别用新鲜培养基和脂肪乳剂孵育;P3组、P6组和P9组神经元细胞分别用100μM异丙酚孵育3 h、6 h和9 h。应用ATP和活性氧（ROS）检测试剂盒测定各组神经元细胞ATP及ROS含量的变化,通过Western Blot检测Cleaved-Caspase-9、Cytochrome C、Bax、Bcl-2等凋亡相关蛋白含量的变化,通过线粒体膜电位试剂盒（JC-1）检测各组海马神经元线粒体的膜电位变化。结果:（1）浓度依赖性:ATP和ROS结果显示:与C组比较,P10组和P100组中ATP含量明显下降,ROS含量明显升高（P<0.05）;与P10组比较,P100组ATP含量明显下降,ROS含量明显升高（P<0.05）;Western Blot结果显示:与C组比较,P10组和P100组Bcl-2蛋白含量明显下降,Bax、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白明显升高（P<0.05）;与P10组比较,P100组Bcl-2蛋白含量明显下降,Bax、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白明显升高（P<0.05）;线粒体膜电位结果显示:与C组比较,P10组和P100组线粒体膜电位明显下降（P<0.05）;与P10组比较,P100组线粒体膜电位明显下降（P<0.05）。（2）时间依赖性:ATP和ROS结果显示:与C组比较,P3组、P6组和P9组ATP含量明显下降,ROS含量明显升高（P<0.05）;与P3组比较,P6组和P9组中ATP含量明显下降,ROS含量明显升高（P<0.05）;与P6组比较,P9组ATP含量明显下降,ROS含量明显升高（P<0.05）;Western Blot结果显示:与C组比较,P3组、P6组和P9组Bcl-2蛋白含量明显下降,Bax、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白明显升高（P<0.05）;与P3组比较,P6组和P9组中Bcl2蛋白含量明显下降,Bax、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白明显升高（P<0.05）;与P6组比较,P9组Bcl-2蛋白含量明显下降,Bax、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白明显升高（P<0.05）;线粒体膜电位结果显示:与C组比较,P3组、P6组和P9组线粒体膜电位明显下降（P<0.05）;与P3组比较,P6组和P9组中线粒体膜电位明显下降（P<0.05）;与P6组比较,P9组线粒体膜电位明显下降（P<0.05）。结论:异丙酚呈浓度依赖性和时间依赖性损伤海马神经元线粒体。第二部分线粒体呼吸链抑制在异丙酚诱导发育期神经毒性中的作用目的:探究线粒体呼吸链抑制在异丙酚诱导发育期大鼠中枢神经毒性中的作用。方法:取发育期大鼠原代海马神经元体外培养至第7天,随机分为对照组（C组）,脂肪乳剂组（I组）,0.25%DMSO组（D组）,100μM异丙酚组（P组）,0.1μM鱼藤酮组（R组）,10μM Coenzyme Q10组（Q组）和10μM Coenzyme Q10+100μM异丙酚组（PQ组）。C组、I组和D组神经元细胞分别用新鲜培养基,脂肪乳剂,0.25%DMSO孵育;P组神经元细胞用100μM异丙酚孵育3 h;R组神经元细胞用0.1μM鱼藤酮孵育1 h;Q组用10μM Coenzyme Q10孵育2 h;PQ组先用10μM Coenzyme Q10孵育2 h,再用100μM异丙酚孵育3 h。通过ATP和ROS检测试剂盒测定各组神经元细胞ATP和ROS含量的变化,通过Western Blot检测Cytochrome C、Bcl-2、Cleaved-Caspase-9、Bax及Apaf-1等凋亡相关蛋白含量的变化,通过线粒体膜电位试剂盒（JC-1）检测各组线粒体的膜电位变化。结果:ATP和ROS测定结果显示:与C组比较,P组和R组ATP含量明显降低,ROS含量明显升高（P<0.05）;与P组比较,PQ组ATP含量明显升高,ROS含量明显降低（P<0.05）;线粒体膜电位测定结果显示:与C组比较,P组和R组线粒体膜电位明显降低,Q组线粒体膜电位明显升高（P<0.05）;与P组比较,PQ组线粒体膜电位明显升高（P<0.05）;Western Blot结果显示:与C组比较,P组和R组Bcl-2蛋白含量明显降低,Apaf-1、Bax、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白含量明显升高（P<0.05）;与P组比较,PQ组Bcl-2蛋白含量明显升高,Apaf-1、Bax、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白含量明显降低（P<0.05）。结论:异丙酚可能通过抑制线粒体呼吸链复合酶体Ⅰ,导致神经元凋亡,产生神经毒性。