口服补液对脓毒症小鼠先天免疫功能的影响

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目的 观察口服补液是否能通过刺激脓毒症小鼠骨髓细胞和肝脏细胞增殖、提高骨髓和肝脏中的调节性树突状细胞(CD11clowCD45RBhighDCs)的数量、CD11clowCD45RBhighDCs占树突状细胞(DCs)的比例来提高脓毒症小鼠生存率。方法 1脓毒症小鼠生存率观察:选取30只健康雄性C57BL/6小鼠,6~8周龄,体重20±1克,用盲肠结扎穿孔(CLP)的方式建立致死性脓毒症模型。将30只小鼠随机分成3组:脓毒症组(C组),低剂量口服补液组(T1组),高剂量口服补液组(T2组)。C组只进行致死性CLP,T1组和T2组小鼠行致死性CLP并在麻醉苏醒后,分别经口向胃灌入25ml/kg和50ml/kg的0.9%生理盐水。操作结束后,同一饲养条件下自由进食水,观察7天内各组小鼠的生存状态以及生存率。2脓毒症小鼠骨髓细胞和肝脏细胞以及骨髓和肝脏中的CD11clowCD45RBhighDCs的变化:另选取60只健康雄性C57BL/6小鼠,6~8周龄,体重20±1克,采用CLP建立非致死性脓毒症模型,分为3组:对照组(CLP组)、低剂量口服补液治疗组(L组)、高剂量口服补液治疗组(H组)。CLP组只进行非致死性CLP,L组和H组小鼠进行非致死性CLP并在麻醉苏醒后,分别经口向胃灌入25ml/kg和50ml/kg的0.9%生理盐水。各组分别于第0、3、5、7天各组随机选择5只小鼠颈椎脱位法处死,取骨髓细胞和肝脏细胞,制成细胞悬液在显微镜下计数骨髓细胞和肝脏细胞的数量。将上述骨髓细胞和肝脏细胞制成单个核细胞悬液,纯化出DCs,随后使用流式细胞仪检测 CD11clowCD45RBhighDCs 的数量和CD 11clowCD45RBhighDCs/DCs 比例变化。结果 1脓毒症小鼠生存率观察:三组小鼠均出现发热、毛发竖起、精神萎靡、运动减少、眼睛周围分泌物增多、食欲差、饮水欠佳等情况。C组、T1组、T2组小鼠生存率分别是0%、20%、60%。与C组相比,T1组小鼠生存率增加(P=0.46),T2组小鼠生存率明显增加(P<0.01);与T1组相比,T2组小鼠生存率升高(P=0.012)。2骨髓细胞和肝脏细胞数量变化:与CLP组小鼠相比,L组和H组骨髓细胞和肝脏细胞有所增加;与L组相比,H组骨髓细胞和肝脏细胞有所增加。上述各组细胞数量差异具有统计学意义如下:1)其中骨髓细胞变化:与CLP组相比,L组小鼠骨髓细胞在第7天明显升高(P<0.05),H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05);与L组相比,H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05)。2)肝脏细胞变化:与CLP组相比,L组在第5、7天明显升高(P<0.05),H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05);与L组相比,H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05)。3骨髓和肝脏中的CD11clowCD45RBhigDCs数量变化:与CLP组小鼠相比,L组和H组骨髓和肝脏中CD11clowCD45RBhighDCs有所增加;与L组相比,H组骨髓和肝脏中CD11clowCD45RBhighDCs有所增加。上述各组细胞数量差异具有统计学意义如下:1)骨髓中CD11clowCD45RBhighDCs的变化:与CLP组相比,L组在第5天明显升高(P<0.05),H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05);与L组相比,H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05)。2)肝脏中CD11clowCD45RBhigDCs的变化:与CLP组相比,H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05);与L组相比,H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05)。4骨髓和肝脏中的CD11clowCD45RBhighDCs/DCs 比例变化:与CLP组小鼠相比,L组和H组骨髓和肝脏中CD11clowCD45RBhighDCs/DCs有所增加;与L组相比,H组骨髓和肝脏中 CD11clowCD45RBhighDC s/DCs 有所增加。上述各组CD11clowCD45RBhighDCs/DCs 比例差异具有统计学意义如下:1)骨髓中CD11clowCD45RBhighDCs/DCs的变化:与CLP组相比,L组在第7天明显升高(P<0.05),H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05);与L组相比,H组在第3、5、7 天明显升高(P<0.05)。2)肝脏中 CD11clowCD45RBhighDCs/DCs 的变化:与CLP组相比,H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05);与L组相比,H组在第3、5、7天明显升高(P<0.05)。结论 1 口服补液可以提高脓毒症小鼠生存率,高剂量口服补液(50m1/kg)组较低剂量口服补液组(25ml/kg)生存率增加。2 口服补液刺激了脓毒症小鼠骨髓细胞和肝脏细胞的数量增殖,增加骨髓细胞和肝脏细胞中CD11clowCD45RBhighDCs数量和比例。3 口服补液可能是通过促进骨髓细胞和肝脏细胞增殖、分化为CD11clowCD45RBhighDCs,调节脓毒症小鼠的免疫功能,提高脓毒症小鼠生存率。图7幅;表5个;参136篇。
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