【摘 要】
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金黄色葡萄球菌是动物临床的主要致病菌,可以引起各种炎症反应,例如奶牛乳房炎、肺炎、心包炎等,抗生素是抑制金黄色葡萄球菌的特效药,然而在治疗细菌感染方面,由于抗生素的滥用,细菌的耐药性越来越严重,姜黄素有很强的抗菌活性,尤其对金黄色葡萄球菌。但是由于姜黄素不易溶于水,在临床上推广应用受到极大限制,因此本试验通过改变姜黄素剂型,将姜黄素包裹在磷脂中,增加姜黄素的溶解度,并进一步对姜黄素脂质体的抗菌活性
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金黄色葡萄球菌是动物临床的主要致病菌,可以引起各种炎症反应,例如奶牛乳房炎、肺炎、心包炎等,抗生素是抑制金黄色葡萄球菌的特效药,然而在治疗细菌感染方面,由于抗生素的滥用,细菌的耐药性越来越严重,姜黄素有很强的抗菌活性,尤其对金黄色葡萄球菌。但是由于姜黄素不易溶于水,在临床上推广应用受到极大限制,因此本试验通过改变姜黄素剂型,将姜黄素包裹在磷脂中,增加姜黄素的溶解度,并进一步对姜黄素脂质体的抗菌活性进行探究。首先建立姜黄素体外分析方法,应用紫外-可见分光光度法检测姜黄素脂质体的包封率,此方法操作简单,重现性好。其次,采用乙醇注入法制备姜黄素脂质体,以包封率为指标进行单因素考察,确定影响因素;采用Box-Behnken Design响应面分析法,以包封率为指标进一步优化姜黄素脂质体的处方,确定最优处方为:磷脂比胆固醇为5:1、药脂比为1:50、缓冲液p H值为7.4、Na Cl含量为29.89 mmol/L,包封率为92.7%;制剂学性质试验结果表明:姜黄素脂质体平均粒径为152.7 nm,Zeta电位-2.00 m V;姜黄素脂质体在含有0.1%吐温的PBS中进行释放,12 h内释放较快,12 h后释放趋于平缓,48 h释放度为90.252%,在4.0℃条件下储存60天,包封率略有下降,25℃储存,包封率显著下降,表示姜黄素脂质体稳定性较差,可进一步进行冻干处理,以提高其稳定性延长贮存时间。最后,研究姜黄素脂质体的体内外抗菌活性,体外抗菌活性试验结果显示,姜黄素脂质体对金黄色葡萄球菌有很强的抗菌活性,对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别为32μg/m L和128μg/m L,进一步通过激光共聚焦观察姜黄素脂质体作用前后金黄色葡萄球菌ATCC 29213后菌株的存活情况,结果显示,姜黄素脂质体作用菌株12 h时,大量菌株死亡,表示姜黄素脂质体体外抗菌活性良好。体内抑菌测定结果显示,对于金黄色葡萄球菌ATCC 29213感染的小鼠,姜黄素脂质体组与空白对照组相比相比腹水中细菌数量差异极显著,姜黄素脂质体组与游离姜黄素组相比腹水中细菌数量差异极显著;姜黄素脂质体组与生理盐水组相比小鼠存活率差异极显著,和游离姜黄素组相比小鼠存活率差异极显著,表示姜黄素脂质体在体内有很好的抗菌活性,与游离姜黄素相比,姜黄素脂质体对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的体内抗菌效果更好。
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