纳米粒子与蛋白质的相互作用及应用研究

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本文主要研究了纳米粒子(CdSe量子点和纳米金)与蛋白质(牛血清白蛋白、牛血红蛋白和兔抗猪免疫球蛋白)的相互作用。在此基础上,制备了金纳米粒子标记的兔抗猪免疫球蛋白(Immunoglobulin G,简称IgG)化学发光(Chemiluminescence,简称CL)探针,并将此探针应用于猪传染性胸膜肺炎的检测中,主要研究内容如下:采用紫外-可见吸收(Ultraviolet visible,简称UV-vis)光谱法研究了水溶性CdSe量子点与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,简称BSA)的相互作用。研究结果表明CdSe量子点与BSA存在强烈的相互作用,BSA分子与CdSe量子点的结合比为1:1;结合常数为9.6×106 L mol-1。采用紫外-可见吸收光谱法、红外(Fourier transform infrared,简称FTIR)光谱法和荧光(Fluorescence,简称FL)光谱法研究了水溶性CdSe量子点与牛血红蛋白(Hemoglobin,简称Hb)的相互作用。研究结果表明CdSe量子点与Hb存在强烈的相互作用。研究表明CdSe量子点与Hb的结合比为12:1;CdSe量子点与Hb可能通过静电吸引力和表面配位平衡作用相互结合。研究了纳米金与兔抗猪IgG的相互作用及纳米金与兔抗猪IgG的最佳偶联条件,并制备了四种不同尺寸的纳米金.兔抗猪IgG化学发光探针。采用紫外-可见吸收光谱法、化学发光法、透射电子显微镜法对该探针进行了表征。结果表明该探针具有很好的单分散性和稳定性。报道了一种基于纳米金-兔抗猪IgG化学发光探针的猪传染性胸膜肺炎检测新方法。采用强氧化剂溶解纳米金-兔抗猪IgG上的金纳米粒子使之生成AuCl4-离子,AuCl4-离子是化学发光反应的分析物,采用检测AuCl4-离子的量来间接检测样品中猪传染性胸膜肺炎ApxⅣ抗体的量。在最佳条件下,血清样品的稀释倍数在1:1 60~1:40000范围内与增长的化学发光光子数呈很好的曲线关系。我们将该方法与传统的ELISA和IHA分析方法的结果进行了比较,结果表明该方法是一种检测猪传染性胸膜肺炎ApxⅣ抗体的稳定和实用的方法。
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