紫杉醇作为一种新型的微管稳定剂,具有独特的抗癌活性,广泛地用于卵巢癌、乳腺癌以及非小细胞性肺癌等的治疗。由于其难溶于水且口服几乎不吸收,目前临床应用的主要是以聚氧乙烯蓖麻油和无水乙醇作为混合溶剂制成的注射剂。然而,由于增溶剂具有很强的副作用,易引起多种不良反应,因此,在使用前需要进行常规的脱敏处理,增加了患者的痛苦和不便。而新上市的白蛋白结合紫杉醇纳米粒注射混悬液Abraxane(?)虽不含有毒溶媒,但由于白蛋白的引入而价格过高,令大多数患者难以承受。目前,研发一种新型的药物载体,在增加紫杉醇溶解性的同时,不会对机体产生任何毒副作用,成为国内外药学工作者关注和研究的热点。本研究在国内外聚合物胶束给药系统研究成果的基础上,尝试用维生素E琥珀酸酯对壳聚糖进行疏水性修饰,利用该接枝物具有两亲性,能够在水性环境中形成胶束结构的特性,将难溶性药物紫杉醇载入到胶束的疏水内核中,期望通过制剂手段,在提高药物生物利用度的同时,达到减小毒副作用的目的。本研究首先以碳二亚胺为交联偶合剂,以壳聚糖(CS)和维生素E-琥珀酸酯(TOS)为原料,通过在壳聚糖的游离氨基与维生素E琥珀酸酯的羧基之间发生酰化反应,制备得到维生素E琥珀酸酯-壳聚糖接枝物(CS-TOS),并采用1H-NMR、FT-IR、DSC和XRD等分析手段,对接枝物的结构进行了确证;通过改变壳聚糖糖单元与维生素E琥珀酸酯的摩尔比例,得到了一系列具有不同氨基取代度的CS-TOS,以三硝基苯磺酸法(TNBS)测得3种接枝物的氨基取代度分别为5.2%,11.5%, 17.4%;接枝物分散于水中,可自聚集形成胶束,以芘荧光探针法测定接枝物在水中的临界聚集浓度分别为1.5×10-2 mg/ml,9.8×10-3 mg/ml,以及5.8×10-3mg/ml,较低的临界聚集浓度(CAC)值保证了接枝物聚集体在稀释的条件下具有较高的物理稳定性。因此,选取最优氨基取代度17.4%的接枝物,采用探头超声法制备空白及载药胶束,以动态光散射法测得二者的粒径分别为11 nm和78 nm, Zeta电位分别为+27.9 mV和+25.7 mV;透射电镜照片显示,空白及载药胶束均呈类球形,且粒度分布较为均匀。经测定,载药胶束的包封率及载药量分别为90.3%和3.8%; DSC及XRD分析结果表明,药物可能是以分子或无定形的形式存在于胶束中;采用透析法考察了载药胶束在PBS 7.4缓冲液中的释放行为,结果显示,载药胶束具有较好的缓释作用。为了在体外对制剂的药效进行初步评价,以人乳腺癌细胞MCF-7为肿瘤细胞模型,采用MTT法,以市售处方制剂为对照,评价载药胶束和空白胶束的细胞毒性。结果表明,在所考察的浓度范围内,载药胶束具有与市售处方制剂大致相等同的细胞毒性,而空白胶束则几乎无细胞毒性,其生物相容性良好;荧光倒置显微镜结果显示,FITC标记的载药胶束能够通过细胞膜进入细胞内,而壳聚糖样品则仅能黏附在细胞膜表面,无法进入细胞;细胞内药物浓度测定结果表明,随着摄取时间的延长,载药胶束的细胞摄取量增加,并且与市售处方制剂相当;体外溶血实验证实,载药胶束具有良好的生物相容性,静脉给药后不易引起溶血。为了考察载药胶束在体内的动态变化过程,以市售处方制剂为参比,进行了大鼠体内的药动学以及小鼠体内的组织分布学研究。首先建立了大、小鼠生物样品的含量测定方法,该方法专属性好,精密度及准确度良好,符合方法学要求。大鼠体内的药动学结果显示,载药胶束延长了药物在体内的作用时间;小鼠体内的组织分布结果表明,载药胶束具有肝、脾靶向性,其在肝、脾、肺中均有一定的滞留作用,而在心脏、肾脏中的浓度则较市售制剂组有所减小,从而有可能降低药物的心、肾毒性。U14荷瘤小鼠体内抑瘤实验结果显示,载药胶束能够显著抑制肿瘤的生长,具有与市售处方制剂相近的肿瘤抑制率,二者分别为68.0%和66.6%;而给药后小鼠体重变化及生存期实验结果表明,高剂量的载药胶束较市售处方制剂具有更低的全身毒性,荷瘤小鼠生存期延长。由此可以得出结论,壳聚糖经维生素E琥珀酸酯修饰后,将有望成为一种有前景的用于紫杉醇静脉注射给药的胶束载体。