【摘 要】
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本研究利用形态学研究、分子手段、化学方法、生理生化等相结合的多相分类研究方法，对一株分离自祁连山黄花棘豆根瘤中的内生芽孢杆菌潜在新种53-2T进行鉴定，以确定其具体分类地位及系统发育关系。形态学特征研究表明，菌株53-2T菌体形状杆状，表面少许褶皱，无鞭毛，大小为0.6-1.0×2.8-4.0μm，中间产芽孢，椭圆形。在培养基上37℃培养，生长良好，12小时可长出单菌落，24小时到达对数期，菌落圆
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本研究利用形态学研究、分子手段、化学方法、生理生化等相结合的多相分类研究方法，对一株分离自祁连山黄花棘豆根瘤中的内生芽孢杆菌潜在新种53-2T进行鉴定，以确定其具体分类地位及系统发育关系。形态学特征研究表明，菌株53-2T菌体形状杆状，表面少许褶皱，无鞭毛，大小为0.6-1.0×2.8-4.0μm，中间产芽孢，椭圆形。在培养基上37℃培养，生长良好，12小时可长出单菌落，24小时到达对数期，菌落圆形，乳白色半透明，湿润，边缘光滑，易挑取。后期菌苔淡粉色，菌落中心产生白色点状物，边缘透明；革兰氏染色阳性。这符合芽孢杆菌的特征。生理生化等表型特征研究表明，菌株53-2T温度生长范围为20℃-60℃，最适生长温度为37℃，pH生长范围为5.0-9.5，可在含有1%6%NaCl的平板上生长，对抗生素敏感，过氧化氢酶反应阳性。在Biolog自动微生物鉴定系统检测中，菌株53-2T可利用9种糖类产酸，具有6项酶活性，可液化明胶，可使硝酸盐还原，能同化8种糖类，可利用45种碳源作为唯一碳源。在所测定的204项生理生化指标中，菌株53-2T与所选参比菌株存在98项差异。分子手段鉴定结果表明，菌株53-2T的16S rDNA序列与已知模式菌株Ornithinibacillus contaminans CCUG53201T和Bacillus acidicola105-2T的亲缘关系最近，相似性均为94.87%。从菌株53-2T的16S rDNA系统发育树可见，该菌株形成一个独立的分支，其DNA G+C含量为37.78mol%，初步判断菌株53-2T是一个新种。化学组分分析结果表明，菌株53-2T脂肪酸主要类型是anteiso-C15:0（18.83%）、iso-C16:0（8.73%）和C16:0（8.90%），其中饱和脂肪酸、支链饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸分别占10.44%、65.74%和20.85%。支链饱和脂肪酸为该菌株53-2T的优势脂肪酸，符合芽孢杆菌属脂肪酸组成，甲基萘醌类型为MK-7，与参比菌株甲基萘醌类型相同。基于以上试验结果，菌株53-2T暂定为芽孢杆菌属的一个新种，拟定名为Bacillussp. nov，Genbank登陆号为KC847111。
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