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目的:研究腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV）介导的结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）和基质金属蛋白酶组织抑制因子1（tissueinhibitor of metalloproteinases 1,TIMP1）单基因及双基因体外联合转染恒河猴椎间盘细胞的生物学效应,并观察双基因体内转染退变的恒河猴腰椎间盘的生物学效应。方法:体外实验:通过酶消化法培养恒河猴腰椎间盘髓核细胞,以不同感染复数（multiplicity of infection,MOI）的rAAV2-EGFP（enhanced green fluorescent protein,EGFP）转染髓核细胞,确定最佳的感染复数。以最佳感染复数的rAAV2-CTGF、rAAV2-TIMP1及rAAV2-CTGF-IRES-TIMP1病毒质粒分别感染髓核细胞,用Westernblot鉴定细胞因子的表达,通过RT-PCR、35S及番红O染色观察CTGF、TIMP1及双基因联合感染髓核细胞的细胞生物学作用。体内实验:CT引导下经皮穿刺纤维环诱导恒河猴腰椎间盘退变,微创经皮注入双基因病毒质粒,应用RT-PCR、Westernblot鉴定细胞因子的表达,RT-PCR、35S及组织学染色观察双基因联合感染对退变椎间盘的生物学作用。结果:体外部分:通过rAAV2-EGFP转染猴腰椎间盘髓核细胞,发现MOI为106时,转染效率较高。rAAV2-CTGF、rAAV2-TIMP1及rAAV2-CTGF-IRES-TIMP1双基因能够转染恒河猴椎间盘髓核细胞,并在其内表达细胞因子。与对照组相比,CTGF可以促进Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,TIMP1可以促进蛋白多糖的合成,对Ⅱ型胶原的合成未见到明显作用。双基因联合感染可以促进髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成,其效果优于单基因。体内部分:经皮穿刺纤维环的方法可以建立椎间盘退变的早期模型,rAAV2-CTGF-IRES-TIMP1双基因可以在体内长期表达,并能促进体内蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成。结论:CTGF可以促进Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,TIMP1可以促进蛋白多糖的合成,对Ⅱ型胶原的合成未见到明显作用。双基因联合感染可以促进蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成,其效果优于单基因。