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肺癌是严重威胁人类生命和健康的恶性肿瘤,具有发病率高、死亡率高、五年生存率低的特点。降低肺癌“两率”以及提高患者预后的关键问题在于肺癌的早期发现和早期诊断。然而,目前仍然缺乏有效的技术和手段。SEREX技术的建立不仅为肿瘤抗原的筛选提供了一种新途径而且该方法通过对肿瘤抗原的自身抗体进行检测为肿瘤的发现提供了一种新型的血清学标志物。然而,目前对这些肿瘤抗原的自身抗体研究甚少,而且已有的研究均集中在对IgG型抗体的研究上,罕有其它类型抗体研究的报道。为此,本研究采用了改进的SEREX方法对介导IgM体液免疫的肺癌抗原进行了筛选和鉴定,采用自己建立的抗原蛋白芯片技术对多个抗原的自身抗体进行了深入的研究,以期揭示这些肺癌抗原的血清抗体谱与肺癌发生、发展的内在联系,从而为肺癌以及癌前病变的早期诊断、高危人群的筛查提供有用的血清学标志物和有效的检测手段。 第一部分 肺癌相关抗原的筛选、分离及鉴定 采用多种病理类型的早期肺癌组织构建了肺癌的cDNA表达文库,原始文库库容达到4×10~6pfu。使用含有多种肺癌病理类型的自体以及30例异体混合血清对介导IgM体液免疫反应的肺癌抗原进行了筛选。目前,使用异体混合血清筛选文库的报道较少,而筛选介导IgM免疫反应的肿瘤抗原还未见报道。结果共获得了78个阳性抗原克隆,核苷酸序列测定和生物信息学分析表明这78个阳性克隆代表了56个不同的抗原基因。根据其生物学