雪莲果低聚果糖提取分离及分析研究

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本课题采用成本较低的雪莲果块茎为原料,利用水浴浸提技术提取低聚果糖,通过絮凝澄清、去蛋白、醇沉、树脂脱色等工艺对雪莲果低聚果糖提取液进行初步分离纯化,并对所得到的雪莲果低聚果糖粗品进行了定量和定性分析,具体如下:第一部分研究了水浴浸提法提取雪莲果水溶性低聚果糖的提取工艺,利用抗坏血酸对雪莲果榨汁液进行护色,对护色剂的用量进行了分析,确定了护色剂的用量为与雪莲果的料液比1:3、浓度为0.3%时的护色效果最佳;对水浴浸提的温度、时间、料液比分别进行了单因素实验和正交试验,最佳提取工艺为:运用水浴浸提法,料液比1:15、提取时间为3h、提取温度为72℃,在优化后的条件下,FOS平均提取率为56.5%。第二部分对雪莲果水溶性低聚果糖进行了初步分离纯化,运用阳离子聚丙烯酰胺凝胶(CPAM)的电性中和和架桥作用对雪莲果榨汁液进行絮凝纯化,考察了CPAM的添加量、絮凝pH值、絮凝时间、絮凝温度四个因素,通过正交试验优化后的工艺条件为:CPAM的添加量为0.08%、絮凝pH值为6、絮凝时间3h、絮凝温度52℃。再通过sevag法除去蛋白并对蛋白质进行定性定量检测,蛋白质浓度c与吸光度y之间的回归方程为:Y=0.041X+0.0043,R=0.998,去蛋白前紫外扫描在280nm处有吸收峰,然后醇沉多糖分离出低聚果糖得到初步分离纯化的低聚果糖粗品,计算粗品的百分含量为56.2%。第三部分比较了D941、D318、DM-2、860021四种树脂对雪莲果FOS浸提液脱色效果的影响,选择了D318为最适树脂,通过静态吸附实验,确定了脱色时间为3h、脱色温度为52℃、树脂用量3.7%,pH值为5.2,运用优化后的条件,对雪莲果FOS提取液多次测定,T的平均值为90.4%。第四部分介绍了雪莲果中低聚果糖的定量和定性分析方法,运用苯酚-硫酸法对雪莲果低聚果糖提取液总糖含量进行测定,绘制了总糖标准曲线:Y=0.0033X-0.0193,R=0.999,运用DNS比色法对提取液的还原糖含量进行测定,绘制了还原糖标准曲线为:Y=0.7787X-0.0564,R=0.999。得到雪莲果样品中FOS的含量为样品中总糖的含量减去还原糖的含量。利用硅胶板薄层层析法对糖类物质进行定性分析,用冰醋酸-氯仿-无水乙醇-水的展开系统能够较好的分开各种糖;同时运用高效液相色谱法检测出雪莲果样品中含有葡萄糖、果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖。
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