研究背景:特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）是一种由不明原因引起的慢性、进行性、纤维化性间质性肺病。其临床特征主要表现为进行性呼吸困难,限制性通气障碍,最终出现呼吸衰竭及死亡。IPF患者的预后极差,治疗手段有限,经确诊后的中位生存期仅为2-4年。IPF的病理表现以肺泡结构紊乱和间质纤维化为主要特征,其发生机制与肺泡上皮细胞的反复损伤和成纤维细胞的增殖活化密切相关。成纤维细胞作为主要效应细胞,在肺纤维化的形成中发挥重要作用。近些年研究发现内质网应激可通过调节成纤维细胞分化来参与肺纤维化发生发展。ERp57作为一种内质网应激伴侣蛋白,可参与内质网应激和新合成糖蛋白的正确折叠与质量控制,然而其是否参与IPF发病及其具体作用机制仍不明确。因此,探究ERp57功能对成纤维细胞活化增殖及细胞外基质合成分泌的作用机制,具有重要科学意义。目的:探究IPF患者及博来霉素诱导的小鼠肺纤维化肺组织中ERp57的表达情况及分布特征;探究ERp57抑制剂（硝唑尼特,Nitazoxanide）对博来霉素诱导的小鼠肺损伤和纤维化程度的影响。探究敲除ERp57或抑制ERp57功能对成纤维细胞活化的影响,以初步揭示ERp57在肺纤维化发生发展中的作用及机制。方法:应用Western Blot和免疫荧光染色检测IPF患者及正常肺组织中ERp57的表达情况和分布特征;构建博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型,运用Western Blot和免疫荧光染色检测ERp57在小鼠肺组织中的表达水平。此外,为进一步探究Nitazoxanide对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响,将野生型小鼠分为以下四组:Saline组,DMSO组,BLM+DMSO组,BLM+Nitazoxanide组.在造模后第21天给予小鼠安乐死,分别采用H＆E、Sirius Red、Masson染色及Ashcroft评分评估小鼠肺组织的纤维化程度;采用Western Blot和q PCR检测Nitazoxanide对肺组织匀浆中纤维化相关指标表达水平的影响。在体外实验中,提取小鼠和正常人原代成纤维细胞,分别应用TGFβ1刺激12,24,48h后,通过Western Blot检测TGFβ1刺激后ERp57和α-SMA的表达水平;同时,利用ERp57 si RNA敲除ERp57或Nitazoxanide处理人原代成纤维细胞,检测ERp57功能缺失对成纤维细胞活化的影响。结果:与正常对照相比,ERp57在IPF患者和博来霉素诱导的小鼠肺纤维化肺组织中表达水平明显升高,且主要分布于成纤维细胞。与非Nitazoxanide处理组相比,病理染色,Western Blot和q PCR结果表明ERp57抑制剂可减轻博来霉素诱导的小鼠肺损伤和纤维化改变,细胞外基质和胶原蛋白累积明显减少;同时Western Blot和q PCR示Collagen I、Fibronectin的蛋白和m RNA表达水平均明显降低。在小鼠和人原代成纤维细胞中,经TGFβ1刺激后,ERp57和α-SMA的表达处于稳定增加的状态。此外,敲除ERp57或抑制ERp57功能均可明显降低Collagen I、Fibronectin、α-SMA的表达水平。结论:ERp57功能的缺失可通过抑制成纤维细胞的活化及细胞外基质的合成分泌来减轻博来霉素诱导的小鼠肺损伤和纤维化改变,从而参与IPF的发病机制。