目的:本实验主要目的是研究BBR在细胞水平抗缺氧/复氧损伤中的作用机制,并利用AMPKα的抑制剂Compound C,深入讨论BBR对抗心肌缺氧/复氧损伤的保护作用是否通过AMPKα蛋白介导。方法:在本实验中,以大鼠H9c2心肌细胞作为实验载体,通过体外心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤模型模拟体内心肌缺血再灌注(I/R)损伤模型。实验随机分成4组,每组重复6次,具体分组如下:(1)正常组(Control组);(2)A/R组;(3)20μM BBR+A/R组;(4)20μM BBR+1μM Compound C+A/R组。MTS法检测细胞存活率;分光光度法检测LDH活性;蛋白免疫印迹法(Western Blotting,WB)检测AMPKα蛋白的表达;DCFH-DA法检测心肌细胞内ROS水平;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法和TUNEL法检测细胞凋亡。结果:1.与A/R组比较,20μM BBR预处理大鼠H9c2心肌细胞可减少LDH释放,降低LDH活性,且差异具有统计学意义(P<0.01),增加细胞存活率(P<0.01);2.蛋白免疫印迹法实验结果表明,20μM BBR预处理可使AMPKα蛋白的表达量增加(P<0.01);3.流式检测结果表明,20μM BBR预处理大鼠H9c2心肌细胞可使细胞内ROS水平降低,以上差异均具有统计学意义(P<0.01);4.AnnexinⅤ-FITC/PI双染的结果表明,20μM BBR预处理大鼠H9c2心肌细胞可以明显减少凋亡,TUNEL结果同样证实这个结果;5.而随着抑制剂Compound C的加入可以部分取消或减弱上述BBR所产生的心肌保护作用。结论:BBR抗心肌A/R损伤作用的机制和上调AMPKα蛋白的表达有一定关系。