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自70年代以来，我国学者率先发现三氧化二砷（As2O3）静脉滴注可有效治疗急性早幼粒细胞性白血病（acute promyelocytic leukemia,APL），取得了极高的临床缓解率，目前也开始用于慢性粒细胞性白血病以及其他类型白血病的临床治疗，其对白血病的作用机制主要是诱导白血病细胞凋亡和促进分化。目前对于三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡过程中信号传导通路的改变机制还不甚明了。核因子-kB（NF-kB）作为一类转录因子，在调控细胞增殖和凋亡相关基因的信号传导中起到关键作用，近年来与肿瘤细胞凋亡的关系日益受到重视。我们研究了三氧化二砷诱导白血病细胞株凋亡的情况以及细胞凋亡过程中伴随的凋亡信号传导通路中关键因子NF-KB及其抑制蛋白1KB-α的变化。 材料与方法 K562细胞，K562／ADR细胞由浙江大学肿瘤研究所提供，U937细胞由浙江大学血液病研究所提供。实验共设三氧化二砷实验组、空白对照组及阴性对照组，三氧化二砷的实验用浓度范围1～16μM，监测时间点选择24小时。 阶沤夭6Bg陀项士6懂伦支 我们以MTT ＆测定三氧化二砷对K562、K562lADR、U937细胞的增殖抑制作用，并求得其24小时的半数抑制浓度（C5）。用流式细胞术（FCM）测定三氧化二砷对三种细胞的诱导凋亡作用，间接荧光法测定细胞浆内IKB－Q蛋白的变化，并用Western印迹法分别检测了H种细胞胞浆内＊－a蛋白和胞核内P65蛋白表达。 结 果 研究结果表明不同的细胞系对三氧化二砷敏感性不同，m旺，m62肘OR，U937的24 ’J’时的半数生长抑制浓度比 值分别为9．06pM，19＊7pM，16．39pM，而且都呈剂量依赖性。FCM结果表明1～SPM的三氧化二砷作用24小时对上述三种细胞系均有不同程度的诱导凋亡作用，其中K562对于三氧化二砷更敏感，SPM的细胞凋亡率是 48．12％，而相同剂量作用于 K562lADR则只有 7，32％的细胞凋亡率，U937细胞凋亡率为 16．32％。对于 U937细胞当三氧化二砷浓度增至16pM时可使细胞凋亡率增加到 55．20％。 间接荧光法结果表明三氧化二砷作用K562细胞后胞浆中IKB－。蛋白阳性表达率明显减少，由对照组的93刀3％减少到spM时的27刀7％，且此降解作用呈剂量依赖性。但是三氧化二砷作用K562lADR和U937细胞后胞浆中IKB－口蛋白表达无明显变化，对照组中K562lADR细胞阳性表达率低于另外两株细胞。W6stem印迹法检测三氧化二砷作用后的三种细胞胞浆内卜巳。蛋白结果与FCM相符。对照组胞核内 P65蛋白 K562细胞无表达，而 K562lADR细胞和 U937细胞均可见组成性表达。三氧化二砷作用后胞核内P65蛋白表达在K562细胞中明显增加，K562lADR中无明显变化，而在U937细胞中有明显降低。 二 浙汇土6B8眩砸士6懂伦支 结 论1．H氧化二砷对K562，K562lADR，U937细胞均有不同程度的增殖抑制作用， 增殖抑制率和凋亡诱导率均表现为陷62细胞＞＊937细胞＞晰62肘OR细胞， 说明其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关。2．三氧化二砷对无NF十B组成性激活的K562细胞可以增加胞核内P65亚基的 表达，对有组成性激活的U937细胞可以抑制胞核内P65亚基的表达，而对由 药物诱导产生组成性激活的K562lADR细胞的胞核内P65亚基的表达无影响。 所以NF十B的组成性活性对三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡程度有重要影响。3．三氧化二砷从0增加到 spM，K562细胞核内 P65亚基表达增加，胞浆中＊B心 蛋白表达率明显减少，而k562lADR和U937细胞两者均无明显差异，表明 胞核内NF－KB的上调和胞浆中IKB－口的下调有关。4．IKB－口与NF十B系统在三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡的信号传导途径中可能 是重要的调节因子。