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研究背景和目的溃疡性结肠炎相关结直肠癌(ulcerative colitis related colorectal cancer,UCRCC)是溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)主要的并发症之一。目前UC活动度评估和癌变监测缺乏理想的血清标志物。本研究拟在UC患者和小鼠模型中探索MicroRNA(miRNA)和长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在 UC 活动度评估和癌变监测中的应用并初步探究其作用机制。第一部分UC活动度和癌变监测相关血清非编码RNA初探方法:1.应用qRT-PCR技术,在对照组(n=35)、轻度UC组(n=21)和重度UC组(n=33)血清中对 5 种候选非编码 RNA(miR-223、miR-21、miR-126、GAS5和SLC25A25-AS1)进行筛选,用ROC曲线分析非编码RNA对UC疾病活动度的评估效力,并将非编码RNA表达情况与血沉ESR、超敏C反应蛋白hsCRP和内镜下Mayo评分进行相关性分析。2.在对照组(n=35)和结直肠癌组(n=30)血清中检测候选miRNAs表达情况。结果:1.UC疾病活动度相关:miR-223在重度UC组较轻度UC组和对照组高表达,分别为 2.40 倍(P=0.0018)和 6.97 倍(P<0.0001);miR-223 在轻度 UC 组较对照组高表达,为2.90倍(P=0.0024)。GAS5在重度UC组较轻度UC组和对照组低表达,分别为 0.812 倍(P=0.0063)和 0.793 倍(P=0.0197)。联合 miR-223 和 GAS5区分轻度和重度UC的敏感性和特异性可达75.8%和85.7%。miR-223的表达与ESR、hsCRP、内镜下Mayo评分呈正相关(P<0.05);GAS5的表达与hsCRP和内镜下Mayo评分呈负相关(P<0.05);miR-223的表达与改良Mayo评分的Spearman相关系数高于ESR和hsCRP,稍低于内镜下Mayo评分。2.UC癌变监测相关:miR-21在结直肠癌组较对照组、轻度UC组和重度UC组均高表达,分别为 2.42 倍(P=0.0030)、5.66 倍(P<0.0001)和 2.40 倍(P<0.0001)。结论:1.miR-223和GAS5的血清表达水平与UC疾病活动度相关。2.miR-223与GAS5对UC活动度的联合评估效力具有较高的敏感性和特异性,提示两者联合使用是潜在的评估UC活动度的血清学指标。3.miR-223和GAS5的表达与临床常用于评估UC活动度的指标具有相关性,且miR-223表达与改良Mayo评分的相关性优于ESR和hsCRP。4.miR-21有可能作为结直肠癌监测的候选血清标志物。第二部分非编码RNA在小鼠模型和UC患者肠组织的表达和机制初探方法:应用qRT-PCR技术,在模型小鼠(结肠炎模型和炎癌模型)和UC患者各组肠组织中检测候选非编码RNA以及miR-223靶mRNA和相关炎症因子mRNA的表达情况。结肠炎模型组小鼠设DSS7组、DSS9组和DSS12组,分别在给予DSS后第7、9、12天处死。结果:1.结肠炎模型小鼠肠道炎症程度:DSS7组>DSS9组>DSS12组。2.非编码RNA:miR-223、miR-21和miR-126在DSS7组较对照组、DSS9组和DSS12组显著高表达;GAS5在DSS7组较对照组、DSS9组和DSS12组显著低表达(P值均<0.05)。miR-223在炎癌模型组小鼠较对照组高表达(P=0.0420)。miR-223和miR-21在重度UC组较轻度UC和对照组显著高表达;GAS5和SLC25A25-AS1在重度UC组较轻度UC和对照组显著低表达(P值均<0.05)。3.相关mRNA:(1)靶mRNA-CLDN8表达情况:DSS7组显著低于对照组、DSS9组和DSS12组(P值均<0.05);炎癌模型组小鼠显著低于对照组(P=0.0259);重度UC患者组显著低于轻度UC组和对照组(P值均<0.05)。(2)靶mRNA-RhoB表达情况:DSS7组低于对照组、DSS9组和DSS12组(分别为P=0.0019、P=0.0846、P<0.0001);炎癌模型组小鼠稍低于对照组,无统计学意义;UC患者肠道中表达无明显规律。(3)IL-1β mRNA表达情况:DSS7组显著高于对照组、DSS9组和DSS12组(P值均<0.05);炎癌模型组小鼠显著高于对照组(P=0.0097)。重度UC患者组表达显著高于轻度UC组和对照组(P值均<0.05)。(4)IL-6 mRNA表达情况:DSS7组高于对照组、DSS9组和DSS12组(P值分别为P=0.0142、P=0.1209、P=0.1987);炎癌模型组小鼠显著高于对照组(P=0.0341);重度UC患者组表达显著高于轻度UC组和对照组(P值均<0.05)。(5)TNF-α mRNA表达情况:DSS7组高于对照组、DSS9组和DSS12组(P值分别为P=0.0095、P=0.0998、P=0.4081);炎癌组小鼠显著高于对照组(P=0.0148)。重度UC患者组表达高于轻度UC组和对照组(分别为P=0.3148和P=0.0289)。结论:1.miR-223、miR-21和GAS5在结肠炎模型小鼠和UC患者肠组织表达水平与炎症程度相关,且miR-223和GAS5与UC患者血清中变化趋势一致。2.miR-126在结肠炎模型小鼠肠组织表达水平与炎症程度相关,SLC25A25-AS1在UC患者肠组织表达水平与炎症程度相关。3.结果初步提示:miR-223可通过下调CLDN8的表达以及提高IL-1β、IL-6的表达参与UC的炎症和癌变过程。miR-223可通过下调RhoB的表达参与小鼠肠道的炎症过程。miR-223可通过提高TNF-α的表达参与小鼠肠道的炎症和癌变过程。