目的:检测非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer, NSCLC)组织与正常肺组织中信号转导与转录激活因子3(Signal transducer and activator of transcription3, STAT3)、细胞周期素D1(cyclinD1)和Ki67蛋白的表达情况,探讨三者之间是否存在相关性同时分析STAT3、cyclinD1和Ki67蛋白是否与非小细胞肺癌的各个临床因素有关。方法:通过免疫组织化学Envision二步法检测正常肺组织(20例)及NSCLC组织(30例)中STAT3蛋白、cyclinD1蛋白及Ki67蛋白的表达情况。所有NSCLC组织均来源于胸外科手术切除获得,患者未作任何放、化疗或其他抗癌治疗。所有标本均经10％福尔马林固定,常规脱水,石蜡包埋,切片机连续切片,清水冲洗,予以缓冲液(PBS)浸泡,将标本放入高压锅进行高温修复抗原,再予以3％过氧化氢灭活内源性过氧化物酶,滴加正常山羊血清封闭液。向标本组织中滴加抗体:一抗分别为 STAT3兔抗人多克隆抗体,鼠抗人 cyclinD1单克隆抗体,鼠抗人 Ki67单克隆抗体,孵育,缓冲液(PBS)冲洗,滴加Envision二抗孵育,缓冲液(PBS)冲洗,二氨基联苯氨(DAB)显色,苏木素复染,透明,封片观察。STAT3蛋白、cyclinD1蛋白及Ki67蛋白均以细胞质或细胞核内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性细胞。实验结果显示,在 STAT3蛋白表达阳性的非小细胞肺癌细胞中,STAT3蛋白主要位于细胞质;在cyclinD1蛋白表达阳性的非小细胞肺癌细胞中,cyclinD1蛋白主要表达在细胞核,少部分表达于细胞质;在Ki67蛋白表达阳性的非小细胞肺癌细胞中,Ki67蛋白的表达主要位于细胞核。根据细胞质或细胞核内出现棕黄色颗粒或棕褐色团块细胞占所有细胞的比例及细胞颜色的深浅将切片按程度划分-、+、++、+++四级。完全不表达或阳性表达少于5％者定为阴性(—);阳性表达细胞在5％-25％之间者定为弱阳性(+),阳性表达细胞在26％-50％之间者为阳性(++),阳性表达细胞大于50％者为强阳性(+++)。结果:⑴STAT3蛋白、cyclinD1蛋白、Ki67蛋白在非小细胞肺癌标本组织中的表达都显著高于在正常肺组织中的表达,统计分析结果显示,差异均有显著统计学意义(P<0.01);⑵ STAT3蛋白、cyclinD1蛋白、Ki67蛋白的表达水平均与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无明显关系(P>0.05);⑶ STAT3蛋白和cyclinD1蛋白在非小细胞肺癌标本组织中的表达水平无明显关系(P=0.787,P>0.05);⑷STAT3和Ki67蛋白在NSCLC组织中的表达水平无明显关系(P=0.341,P>0.05);⑸cyclinD1蛋白和Ki67蛋白在NSCLC组织中的表达水平同样无明显关系(P=0.673,P>0.05)。结论:⑴STAT3蛋白、cyclinD1蛋白和Ki67蛋白在非小细胞肺癌标本组织中的表达显著高于正常肺组织,经统计学分析,差异均有显著统计学意义(P<0.01),因此STAT3蛋白、cyclinD1蛋白和Ki67蛋白的过度表达可能与非小细胞肺癌的发生和发展有着密切的关系。⑵ STAT3蛋白、cyclinD1蛋白和Ki67蛋白在非小细胞肺癌中的表达与患者的各临床因素如(年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移和TNM分期)无关,经统计学分析,差异均无统计学意义(P>0.05)。⑶通过相关性研究发现,STAT3蛋白、cyclinD1蛋白和Ki67蛋白在非小细胞肺癌中的表达无明显联系,经统计学分析,差异均无统计学意义(P>0.05),所以在非小细胞肺癌的发生、发展过程中, STAT3蛋白、cyclinD1蛋白和Ki67蛋白可能是独自发挥作用的,无互相协同作用。