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背景与目的细胞遗传学信息对于骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndromes, MDS)的诊断分型和预后评估都具有非常重要的价值。多重连接探针扩增技术(Multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)利用核酸杂交、连接反应和PCR扩增反应,可以在同一试管内检测多个不同核酸序列拷贝数变化(copy number variation, CNV),目前已广泛应用于染色体异常研究、基因点突变及缺失突变研究、基因甲基化研究等领域。本研究引进MLPA对临床诊断为MDS的患者进行染色体拷贝数的检测,在此基础上对其临床应用进行方法学评价。研究方法本研究对437例MDS患者骨髓细胞DNA标本进行MLPA检测,并应用20例健康志愿者的外周血标本设立各探针的正常范围。应用Kaplan-Meier, Log-rank检验及COX回归模型评估影响预后的因素。结果1.437例MDS患者骨髓细胞DNA标本通过了DNA质量验证,进行了MLPA检测并得到了可分析的检测结果。在153例(35.0%)患者中检测到了至少一种CNV。2.在染色体核型无分裂象的5例患者中2例(40%)检测到了+8异常,而在235例仅有正常分裂象(1-20个分裂象)的患者中20例患者(8.5%)检测到了至少一个CNV,可能改变了其预后分组。3.在染色体核型分析异常的197例患者中,MLPA共检出131例(66.5%)存在CNV,66例未检出CNV,其中12例为复杂核型异常,41例为MLPA探针未能覆盖区域异常或染色体结构异常,10例异常核型克隆较小(仅有2-3个分裂象包括+8异常)。4.将年龄、性别、IPSS-R分组、-7／7q-及17p-纳入COX回归模型分析,发现年龄(P=0,002, HR=1.021,95%CI 1.008-1.034).-7/7q-(P=0.040, HR=1.714, 95%CI 1.025-2.865)和17p-(P=0.018, HR=2.238,95%CI 1.148-4.363)是独立于IPSS-R的不良预后因素。结论MLPA检测方法稳定高效,在疑诊ⅧS的患者中可以作为染色体核型检查的有效补充,提高患者诊断及预后分组的准确性。背景与目的评价环孢素(CsA)联合沙利度胺(Thalidomide)对IPSS低危／中危-1骨髓增生异常综合征(MDS)患者的远期效果及影响疗效的因素。研究方法回顾性分析76例应用CsA联合Thalidomide治疗的IPSS低危／中危-1 MDS患者,根据国际工作组2006疗效标准评价疗效。聚合酶链式反应(PCR)联合直接测序法检测患者cereblon基因rs1672753位点基因型。采用COX回归风险模型进行多变量分析确定预后的独立影响因素。研究结果1.40例(53%)患者获得血液学进步(HI)。红系反应率(HI-E)为43%(31/73),中性粒细胞反应率(HI-N)为30%(15/50),血小板反应率(HI-P)为31%(18/58)。59例红细胞输注依赖患者中27例(46%)获得红系反应并脱离输血。2.治疗反应的中位持续时间为22(1-131+)月。单因素分析显示骨髓原始细胞≤2%的患者疗效持续时间更长(P=0.010)。3. Cereblon基因rs1672753位点基因型与患者的治疗反应率及治疗反应的维持时间无显著相关性(P值均>0.05)。4.67例未进行造血干细胞移植的患者纳入生存分析,中位生存时间为74个月(95%CI,41-106)。采用COX回归进行多变量分析,IPSS-R分组(HR=3.461, 95%CI 1.126-10.639,P=0.030)、年龄>60岁(HR=4.120,95%CI 1.070-15.867,P=0.040)以及HI-N (HR=7.733,95%CI 1.007-59.396, P=0.049)为影响患者生存期的独立预后因素。结论CsA联合Thalidomide治疗能长期改善IPSS低危/中危-1 MDS患者贫血症状,不良反应轻。在此组患者中未能验证Cereblon基因rs1672753位点基因型对疗效的预测价值。