经白藜芦醇处理的朊病毒感染细胞外泌体中miRNA表达谱的分析

来源 :中国疾病预防控制中心 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flash_chen
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
朊病毒病又称为传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs),是一种侵袭人类和多种动物的神经退行性疾病,致死率100%。其致病机制主要为体内正常的朊蛋白(PrPC)构象发生改变,从而形成具有传染性的阮病毒(PrPsc)。外泌体是细胞向外分泌的一种大小在30-150nm的小囊泡,近年来人们发现外泌体在朊病毒的传播过程中发挥了重要的作用。作为外泌体中重要内容物的miRNA,是一种由18-24个核糖核酸组成的非编码RNA,被证明在朊病毒感染的细胞外泌体中发生异常表达。miRNA可以被选择性的装配到外泌体中,然后随外泌体进入受体细胞并发挥作用。白藜芦醇是一种天然的多酚类的化合物,存在于多种水果或蔬菜中。研究表明白藜芦醇可以有效降低朊病毒感染细胞SMB-S15中PrPSc的含量,但是其机制目前并不清楚。为了探究在白藜芦醇清除SMB-S15细胞PrPSc的过程中,细胞外泌体中的miRNA的变化,我们提取了朊病毒感染的细胞SMB-S15(S15)、白藜芦醇处理4天的SMB-S15细胞(RES4)、白藜芦醇处理8天(RES8)以及经硫酸戊糖处理去除了 PrPSc的SMB-315细胞(PS)四种细胞外泌体中的miRNA,并对提取的miRNA进行深度测序,分析miRNA在不同组的差异表达,以及通过GO与KEGG pathway分析差异表达的miRNA所参与的信号通路。与实验室前期实验结果一致,发现白藜芦醇处理SMB-S15细胞4天时,细胞中PrPsc的含量明显下降,而处理8天时,细胞中PrPSc已完全不能被观察到。为了探究细胞中PrPSc在被清除过程中miRNA表达是否存在规律,我们分别检测了白藜芦醇作用4天和8天的朊病毒感染细胞外泌体中的miRNA,结果显示表达变化的差异非常明显和复杂。以S15组为对照我们将RES8组表达上调或者下调在8倍以上的miRNA筛选出来发现:其中有22种miRNA在S15、RES4以及RES8三组中呈现逐渐升高的趋势;52种miRNA呈现先降低后增高的趋势;6种miRNA呈现先升高后降低的趋势;4种miRNA呈现逐渐降低的趋势。PS细胞为S15细胞经过硫酸戊聚糖清除PrPSc后的细胞,我们以S15组为对照,比较了不同药物清除PrPSc的RES8与PS组中miRNA的变化。结果显示,两种细胞外泌体中的miRNA表达均以上调表达的miRNA数目居多,分别占总变化miRNA的62.1%和82%。对两者的KEGG和GO进行分析,显示参与了类似的细胞生理功能。外泌体是细胞之间进行信息交换的重要介质,也是病毒在细胞间进行播散的重要途径,外泌体中miRNA的变化与疾病的发生和发展密切相关。在本研究中,我们检测了白藜芦醇在清理SMB-S15细胞中PrPsc的外泌体中miRNA的表达变化情况,对于了解朊病毒致病及传播机制提供了重要的科学数据。同时外泌体是易获的对机体无损伤的生物样本,外泌体中与疾病相关的miRNA的寻找也为疾病的诊断提供了帮助。
其他文献
中韩两国政府今年6月1日正式签署了《中华人民共和国政府和大韩民国政府自由贸易协定》(以下简称《协定》)。根据《协定》,在开放水平方面,双方货物贸易自由化比例均超过税目
预制混凝土企口板挡水墙结构具有自身强度高费用低,施工方法简单施工周期短且整体坚固性好是近年来研发出的一种新型挡水墙结构;该结构可在雨中和陆地以及沼泽地作业节省永久
目的:比较甲状腺微小乳头状癌患者微波消融与手术切除的疗效、安全性与经济性。方法:选择2014年1月至2017年2月浙江大学医学院附属第二医院经甲状腺超声检查高度怀疑甲状腺微
近年来,以三维织物为增强体,树脂、陶瓷材料为基体,复合成三维纺织结构复合材料,被广泛应用在航空、航天、航海等高端装备上。现有三维织机基本上是通过二维织机改造而来,仍
采用同时蒸馏-萃取方法提取云南产牛蒡子的挥发油,并使用气相色谱-质谱联用仪分析其化学成分,该联用仪工作条件:载气流速1.0 m L/min;进样方式为分流进样,分流比20∶1,进样口
文章采用ASP.NET、ADO.NET技术、SQL SERVER 2000数据库,设计并实现了基于C/B和B/S模式的食品安全预警系统。讨论了系统体系结构、功能模块、实现的关键技术及网络安全防御机
目的探索溶出度仪的系统适用性校正方法中溶剂的脱气程度对实验结果的影响.方法参照美国药典中溶出度仪的系统适用性校正方法.结果与结论溶剂中溶解的气体对实验结果影响很大
目的:本研究通过与常规针刺法相对照,探讨从经筋角度进行埋线治疗膝骨性关节炎的有效性和优越性,从而选择更有优势的治疗方法应用于临床。方法:收集自2017年1月至2017年12月
目的1.分析切口妊娠的经阴道三维断层超声表现,探讨经阴道三维断层超声成像对切口妊娠的诊断价值。2.分析切口妊娠的超声造影表现,概括切口妊娠的造影增强特点。3.以病理结果
研讨式教学是值得推广的一种新的教学模式,它以教学问题为导线,让学员们探究问题、解决问题,使学员们在研究问题、解决问题的过程中不断提升能力。军事地理作为一门重要的课