【摘 要】
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在哺乳动物卵巢中,存在大量处于卵泡发育各时期的卵泡。由于卵泡直径的不同,其卵母细胞体内的抗氧化系统可能不同,从而对卵母细胞在体外培养的发育潜能造成影响。本研究以牛的卵巢为试验样本,按照卵泡直径的不同,分为Small组1.8-5 mm,Large组5-10 mm,从卵泡中回收牛卵丘卵母细胞复合物（COCs）,并按照COCs评级进行分级,通过体外培养,检测GV期,MII期及8细胞期时,卵母细胞受精后发
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在哺乳动物卵巢中,存在大量处于卵泡发育各时期的卵泡。由于卵泡直径的不同,其卵母细胞体内的抗氧化系统可能不同,从而对卵母细胞在体外培养的发育潜能造成影响。本研究以牛的卵巢为试验样本,按照卵泡直径的不同,分为Small组1.8-5 mm,Large组5-10 mm,从卵泡中回收牛卵丘卵母细胞复合物（COCs）,并按照COCs评级进行分级,通过体外培养,检测GV期,MII期及8细胞期时,卵母细胞受精后发育能力,活性氧含量,谷胱甘肽含量,线粒体膜电位水平,抗氧化相关基因m RNA表达量等主要检测指标。研究卵泡直径对牛卵母细胞和早期胚胎氧化应激的影响。试验结果如下:1.卵泡直径对牛卵母细胞发育的影响:将卵母细胞按照不同直径进行分组,并抽取进行体外培养至MII期及8细胞期后发现,Large组与Small组成熟率相似（P>0.05）;Large组的分裂率和8细胞率均高于Small组（P<0.05）。2.卵泡直径对牛卵母细胞氧化应激的影响:（1）将来自Large组和Small组GV期和MII期的卵母细胞,分别进行ROS,GSH,JC-1水平检测后发现,GV期时,Large组的ROS水平低于Small组（P<0.05）;GSH水平高于Small组（P<0.05）;ΔΨm低于Small组（P<0.05）。在MII期时,Large组的ROS水平高于Small组（P<0.05）;GSH水平低于Small组（P<0.05）;ΔΨm低于Small组（P<0.05）。（2）利用qRT-PCR在卵母细胞处于GV期和MII期时,分别对Large组和Small组对抗氧化相关基因（SOD1,SOD3,SIRT2,GPX1）的m RNA进行检测后发现,GV期及MII期时,Large组卵母细胞中上述抗氧化基因表达量均高于Small组（P<0.05）。3.卵泡直径对牛早期胚胎氧化应激的影响:（1）将来自Large组和Small组的COCs体外培养至8细胞期,分别检测ROS,GSH,JC-1水平后发现,Large组ROS水平高于Small组（P<0.05）,GSH水平高于Small组（P<0.05）,ΔΨm高于Small组（P<0.05）。（2）利用qRT-PCR在卵母细胞体外培养至8细胞期时,分别对Large组和Small组对抗氧化相关基因（SOD1,SOD3,SIRT2,GPX1）的m RNA进行了检测,Large组各抗氧化基因表达量均高于Small组（P<0.05）。结果表明,大卵泡组的卵母细胞发育潜能更高,在GV期,大组的卵母细胞受到的氧化应激相对来说更小;在MII期,在体外培养过程中,大组对外界氧浓度的变化更敏感;在8细胞时期,大卵泡组的还原能力更强,且线粒体状态更稳定。
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