电针内关穴对心肌缺血小鼠心肌钙调蛋白及相关基因表达影响的研究

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目的:通过针刺心肌缺血模型小鼠内关穴、列缺穴及非经非穴,观察心肌组织CaM、CaMKⅡ和L-型钙通道的α1亚基基因表达水平的变化,从基因水平揭示针刺内关穴对心肌缺血的保护机制,为电针内关穴对心肌缺血具有良好的调整作用提供实验依据。材料与方法:将40只健康成年ACCN3基因敲除小鼠按随机数字表法随机分成空白对照组、模型组、内关组、列缺组、非经非穴组,每组各8只。除空白对照组外,其他组采用皮下多点位注射盐酸异丙肾上腺素(85mg/Kg)建立心肌缺血小鼠模型;空白对照组在相同部位注射等量生理盐水。造模成功后,分别取内关穴、列缺穴,非经非穴,常规消毒后,以华佗牌无菌针灸针0.18ⅹ25mm,进行针刺,内关穴、非经非穴采用针体与皮肤呈90°角直刺的方法进行操作,列缺穴采用顺经呈30°角斜刺的方法,刺入皮下2-3mm,连接电针,电针治疗选用疏密波,频率2/50Hz,强度2-4mA,以小鼠肢体微微颤动为度,留针20分钟,每日1次,连续针刺七天。记录各组小鼠心电图Ⅱ导联T波振幅的变化。各组针刺七天后处死小鼠,应用实时荧光定量聚合酶联反应技术(Real-timePCR)检测心肌组织钙调蛋白(CaM)、钙调蛋白激酶(CaMKⅡ)及L-型钙通道的α1亚基的基因表达水平。结果:1.与空白对照组比较,模型组小鼠心肌组织CaM、CaMKⅡ及L-型钙通道的α1亚基的基因表达均显著提高,具有统计学意义(P<0.01)。2.与模型组比较,内关组、列缺组、非经非穴组小鼠心肌组织CaM、CaMKⅡ及L-型钙通道的α1亚基的基因表达均显著降低,有统计学意义(P<0.01)。3.内关组与列缺组比较,有统计学意义(P<0.05),内关组与非经非穴组比较,有显著差异(P<0.01)。结论:1.电针心包经内关穴可显著降低缺血心肌组织CaM、CaMKⅡ及L-型钙通道的α1亚基的基因表达。2.电针内关穴治疗心肌缺血的机制,可能是通过对L型钙离子通道的调控作用,减轻了“钙超载”而实现的。
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