目的：重组腺相关病毒(rAAV)被认为是最具应用前景的基因治疗病毒载体,应用其进行β-地中海贫血治疗是一项具有极大的应用价值的研究。然而rAAV感染效率低下一直是困扰研究者的难题,特别是对本身就难以感染的造血干细胞来说,其感染效率更加不理想。本研究从rAAV的包装到感染各过程进行研究探索,对比优化其包装及感染过程中的材料方法,并进行改进。致力于获得高效感染造血干细胞的AAV病毒及感染条件。方法与结果：本研究主要集中于病毒包装过程和感染过程的优化与改进。在病毒的包装中,本实验分别采用PEI转染法及磷酸钙转染法包装病毒；超速离心层析纯化法及肝素-琼脂糖亲和纯化法纯化rAAV病毒,qPCR法及斑点杂交法进行病毒滴度测定,对比各种方法对rAAV感染活性的影响及区别,对rAAV病毒包装过程造成rAAV活性降低的步骤予以优化及改进,获得了一套完整的优化的包装高活性高感染效率的rAAV包装体系。在感染过程中的优化阶段,引入了自身互补腺相关病毒(scrAAV),同时结合采用rAAV外壳突变技术,对rAAV衣壳蛋白上暴露的酪氨酸位点进行突变,获得外壳突变型rAAV,很大的提高了rAAV对造血干细胞的感染效率。与此同时,在感染的过程中,发现感染体系中的各个感染条件对于rAAV的感染效率有十分大的影响。于是对感染条件：感染时间、血清浓度、感染滴度及感染后处理等进行了详细的探索,发现他们之间存在着复杂的相互影响,经过一系列实验,优化得到一个针对于造血干细胞的感染体系,相对以前的感染体系,大幅提高了感染效率。同时对感染前处理进行了探索,并首次发现ZY可以提高rAAV的感染效率,特别是结合羟基脲,可以很大幅度增加rAAV的感染效率,这是首次发现。结论：通过对一系列的指标的优化和改进,获得了一套完整的优化的包装高活性高感染效率的rAAV包装体系。同时得到了针对造血干细胞的高效感染体系。于世界首次发现了ZY对rAAV感染效率的提高作用。