槐角提取物脂质体凝胶的制备与评价

来源 :黑龙江省中医药科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dayoudian
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目的:研究提取、分离纯化槐角提取物的最佳工艺参数,得到较高纯度的槐角苷产物研究槐角提取物脂质体的制备工艺并进行初步评价研究槐角提取物脂质体凝胶的最佳制备方法并进行质量评价方法:1.采用高效液相色谱(HPLC)法检测槐角苷得率为评价指标,先进行单因素考察,然后通过正交试验确定槐角提取物超声提取法的最佳工艺。通过静态吸附解吸实验比较6种大孔吸附树脂分离纯化槐角提取物的效果,进一步优化大孔树脂分离纯化槐角提取物的工艺参数,并将此条件下的洗脱液浓缩,析出沉淀,洗涤,得到终产物,最后采用IR、HPLC、MS法验证产物结构。2.建立槐角提取物脂质体及其凝胶的HPLC含量测定方法,以包封率为评价指标,确定适合制备槐角提取物脂质体的方法,通过单因素和响应曲面法优化制备工艺和处方;采用包封率为指标评价脂质体再分散方法是否可行;用透射电镜观察再分散脂质体的形态,用纳米粒度分析仪测定其粒度分布和Zeta电位值。3.考察CMC-Na、HPMC、MC以及卡波姆940等基质的成胶特性,筛选适宜的凝胶基质及其用量,以失水率考察保湿剂种类及添加量,以透皮量考察促渗剂种类及添加量,然后结合实际确定其他添加剂用量并确定槐角提取物脂质体凝胶的处方;考察槐角提取物脂质体凝胶的性状、p H值、粘附性,采用CCK-8法和Franz扩散池法进行细胞毒性实验和体外释放实验来评价槐角提取物脂质体凝胶的作用以及安全性,最后对凝胶的耐热及耐寒稳定性、储存稳定性等进行考察。结果:在超声提取槐角提取物的最佳工艺条件下槐角苷平均提取得率为5.2%;AB-8型大孔树脂较适合吸附分离槐角提取物,最佳工艺条件下,终产物槐角苷的纯度达到85%左右,提取分离工艺重复性RSD均小于2%,重复性良好,产物经IR、HPLC、MC鉴别说明主成分结构与槐角苷一致。脂质体的最佳处方为磷脂与胆固醇的比例为6/1(m/m),药脂比为1/17(m/m),水化温度49℃,该处方条件下,三批槐角提取物脂质体的平均包封率为90.3%。脂质体在离心分散后平均包封率为83.9%,脂质体质量评价结果为:最佳工艺所制备的脂质体为圆形或类圆形,平均粒径为102.3 nm,PDI小于0.3,Zeta电位平均值为-31.8 m V。本实验成功制备出槐角提取物脂质体凝胶,凝胶基质为3%CMC-Na,确定10%的甘油为保湿剂,选择5%丙二醇为促渗剂,制备出的脂质体凝胶质地均匀,p H值适宜,保湿、黏附性能良好,体外细胞活力较好,温和无刺激,具有一定的用药安全性,体外释药稳定,相比于槐角提取物原药凝胶释放较快,具有良好的透皮性能,稳定性实验显示本制剂耐热、耐寒的效果良好,室温避光密封储存稳定性较好。结论:本实验采用的提取分离方法效率高,工艺简便、稳定,能够为槐角提取物制剂实验提供前期物质基础;在优化的处方和工艺条件下制备出的槐角提取物脂质体的基础上制备出了槐角提取物脂质体凝胶剂,其外观明亮,稳定性良好,细胞相容性较好且无刺激性,能够改善槐角提取物的皮肤渗透性,增强透皮效果,提高其生物利用度,有助于药物疗效的发挥,具有良好的开发及应用前景。
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