论文部分内容阅读
第一部分早期高血压大鼠微循环功能障碍特征的研究目的:研究早期高血压大鼠耳缘末梢微循环形态及功能特征的变化。方法:以8周龄高血压大鼠（SHR）和血压正常的对照大鼠（WKY）各6只,采用激光多普勒血流成像和定量检测仪及激光微循环形态和功能分析仪等多种技术,进行血流灌注量、血流速度、血细胞聚集度及微循环、微血管形态和功能检测分析。结果:激光多普勒定量检测结果显示:SHR组末梢微循环血流灌注显著低于对照WKY组（P=0.047）;SHR组末梢微循环平均血流速度低于对照WKY组（P=0.028）。激光微循环形态和功能检测结果显示,SHR组末梢微血管的迂曲度降低（P=0.153）,功能性微血管密度显著降低（P<0.001）,不同直径微血管的总长度明显减小,直径在30-50 μm的微血总长度减小最为显著（P=0.033）。结论:在原发性高血压发病早期已经出现了微循环功能障碍,表现为有效的功能性微血管密度的显著减小,不同直径的功能性微血管总长度的显著减少。提示在高血压发病的早期存在外周的微循环和微血管的功能障碍,即外周微循环功能障碍是高血压发病的重要原因。第二部分早期高血压大鼠血压与微循环功能障碍的相关性目的:通过对早期高血压大鼠的血压及微循环功能性特征结果进行相关性分析,探究早期高血压大鼠血压与微循环功能障碍的相关性。方法:利用激光多普勒血流成像和定量检测仪及激光微循环形态和功能分析仪所得血流灌注、血流速度、血细胞聚集度、功能性微血管密度、功能性微血管流及不同直径范围的微血管总管长度,通过Pearson相关性分析软件将血压与所有测量指标进行相关性分析。结果:激光多普勒定量检测指标结果和激光微循环形态和功能检测结果的相关性分析显示:平均血流速度在SHR组发现降低显著,小波转换后,不同来源的血流速度与平均血流速度相一致,均为WKY组高于SHR组。其中发现平均血流速度与心率、收缩压、平均动脉压、舒张压呈显著负相关（r=-0.573、-0.662、-0.72、-0.689,P<0.05或P<0.01）,与血流灌注呈现显著正相关（0.868,P<0.01）。平均血细胞聚集度在SHR组中发现是升高的,小波分析后,心脏活动来源与呼吸活动来源的差异最显著（P=0.036,P=0.038）。在相关性的分析中发现,心脏来源的血细胞聚集度与心率、收缩压、平均动脉压、舒张压及脉压差呈显著正相关（r=0.604、0.637、0.678、0.619、0.538,P<0.01）,与血流灌注、平均血流速度、肌源性活动来源的血流速度及神经源来源的血流速度呈显著负相关（r=-0.691、-0.925、-0.577、-0.653,P<0.01）。呼吸活动来源的血细胞聚集度与心率、收缩压、平均动脉压、舒张压、脉压差及心脏来源的血细胞聚集度呈显著正相关（r=0.641、0.644、0.653、0.592、0.587、0.959,P<0.05或P<0.01）,与平均血流速度、神经源来源的血流速度呈显著负相关（1=-0.84、-0.539,P<0.05）。微血管密度与心率、收缩压、平均动脉压、舒张压、脉压差、心脏来源的血细胞聚集、呼吸活动来源的血细胞聚集度呈显著负相关（r=-0.864、-0.91、-0.914、-0.865、-0.772、-0.738、-0.709,P<0.01）,与血流灌注、平均血流速度、为血管迂曲度呈显著正相关（r=0.785、0.754、0.723,P<0.01）。结论:在原发性高血压发病早期已经出现了微循环功能障碍且与血压的增高呈显著相关性,提示早期外周微循环和微血管功能障碍与血压的增高密切相关。第三部分内皮细胞外泌体对高血压大鼠微循环功能的改善作用目的:通过注射内皮外泌体研究外泌体对早期高血压大鼠耳缘末梢微循环形态及功能特征的变化。方法:利用培养内皮细胞（HUVECs）收集上清,从培养上清液中提取外泌体,获得外泌体后用BCA蛋白浓度检测法进行浓度检测。采用尾静脉注射外泌体干预的方法,将大鼠分为WKY组,SHR对照SHR-Baseline组（SHR-B）,SHR正常外泌体SHR-Cexo组（SHR-Cexo）,每组6只,进行激光多普勒检测系统及CapiScope CAM1激光微循环功能和形态分析仪（CapiScope CAMl Capillary Anemometer）的检测。观察Oh、5 h、24h大鼠耳缘血管的血流灌注、血流速度、血细胞聚集度及功能性微循环情况。结果:在注射正常外泌体后,血流灌注及平均血流速度都有明显增加,经小波转换分析后,内皮来源的血流速度增加显著,血细胞聚集度有不同程度的降低。同时,SHR-Cexo组的大鼠的不同直径范围微血管总长度,尤其直径小于50 μm的微血管总长度,微血管迂曲度及功能性微血管密度也增加显著（P<0.05）。结论:内皮细胞来源外泌体能够有效改善高血压大鼠微循环微血管的功能,提示正常内皮来源的外泌体能够具有通过改善微循环减缓治疗高血压的潜力。