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目的:本实验以自制载紫杉醇纤维毡诱导U14宫颈癌细胞凋亡并研究其对小鼠U14皮下移植瘤的抑制作用。方法:1、负载紫杉生物可降解纳米纤维毡的细胞毒性试验:体外法。2、U14宫颈癌细胞在纤维毡存在下孵育48h,然后以流式细胞仪和Annexin V-FITC及PI双染法检测细胞凋亡比例。3、在建立U14宫颈癌皮下移植瘤balb-c小鼠模型的基础上,研究载紫杉醇的聚乳酸纤维毡对小鼠肿瘤的作用。4、荷瘤balb-c小鼠37只(瘤体积约为100-250mm~3),随机分为三组:A组为对照组,不做任何处理;B组为未载药纤维组;C组为载药纤维组。B、C组小鼠局部消毒后以弧形切口切开肿瘤表面皮肤,在不破坏血供的前提下尽可能剥离并暴露肿瘤,并用纳米纤维毡覆盖暴露出的肿瘤表面,覆盖率约为70-75%,然后关合皮肤,缝合创面。其中B组纤维毡为聚乳酸电纺丝纳米纤维,不载药,C组为同种材料纤维毡,载有33w%紫杉醇。手术处理后第7、14天每组各处死小鼠5-7只,剥离肿瘤,照相,称重,计算抑瘤率。结果:(1)制备了担载紫杉醇的PEG-PLA电纺丝纤维。电镜照片显示紫杉醇被完全包裹在载体纤维中。(2)通过细胞计数法、MTT法,验证载紫杉醇聚乳酸纳米纤维毡对U14细胞存在抑制作用。并与持续给药时间及给药剂量呈正相关。(3)通过流式细胞仪分析结果表明,经载药纤维(折合紫杉醇浓度40μg/ml)处理48小时后,活细胞约占72.5%;凋亡早期细胞20.5%;凋亡晚期细胞5.1%。总凋亡细胞比例(25.6%)明显高于对照组(1.0%)和未载药纤维组(1.5%)。(4)载药纤维毡包裹U14宫颈癌皮下移植瘤后有明显抑制作用,第7天和第14天与对照组相比的瘤重抑制率分别为47.8%和56.0%(P<0.05)。B组动物虽经过手术处理,肿瘤表面用未载药聚乳酸纤维包裹,第7天和第14天的肿瘤质量与对照组无显著差别,说明聚乳酸纤维本身对肿瘤没有抑制作用,载药纤维组所观察到的抑瘤效果为紫杉醇从纤维毡中释放所致。结论:1、载药聚乳酸纳米纤维毡对体外培养的U14细胞系有显著的增殖抑制作用,并与持续给药时间、和给药的剂量呈正相关。2、载药聚乳酸纳米纤维毡对体外培养的小鼠宫颈癌U14细胞有诱导凋亡作用。3、成功建立的U14宫颈癌皮下移植瘤balb-c小鼠模型,可行性高,较易推广。4.载紫杉醇纳米纤维毡对U14宫颈癌小鼠皮下移植瘤有明显抑制作用,适合用于对宫颈癌的局部化疗,值得进行进一步研究。创新点:1、以自制载紫杉醇纤维毡诱导U14宫颈癌细胞凋亡并研究其对小鼠U14皮下移植瘤的抑制作用。2、在C组中使用的纤维毡为静电纺丝聚乳酸纤维其中含有33%(wt)的紫杉醇,药物含量较高。3、紫杉醇纳米纤维毡对U14宫颈癌小鼠皮下移植瘤有明显抑制作用,适合用于对宫颈癌的局部化疗,值得进行进一步研究。