A群脑膜炎球菌培养基优化研究

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本研究以半综合培养基为基础,从氨基酸分析入手,以胰酪蛋白胨,牛肉浸出物和酵母浸出物来替代基础液中的50%酪蛋白盐酸水解液,牛肉胰酶消化液和1:4酵母透析液,以实现培养基的标准化。单因素替代物试验得出,三种替代物在一定程度上促进A群脑膜炎球菌生长。三因素替代物正交试验得出,半合成培养基成分中各个因素对A群脑膜炎球菌影响依次顺序为胰酪蛋白胨,牛肉浸出物,酵母浸出物。并得出最佳浓度为胰酪蛋白胨26mg/mL,牛肉浸出物23mg/mL,酵母浸出物0.02mg/mL,得出菌体浓度为58×108/mL,细胞干重为0.210g/100mL,比改良前分别提高34.9%,14.8%。这表明干粉替代基础液是可行的,同时优化了培养基。本研究还通过分析发酵前后氨基酸的变化得出半胱氨酸和色氨酸为A群脑膜炎球菌生长的必须氨基酸。以半合成培养基为基础,研究半胱氨酸,色氨酸添加量及对A群脑膜炎球菌生长的影响,以实现培养基的标准化。单因素替代物试验得出,两种氨基酸的添加,都会在一定程度上促进A群脑膜炎球菌生长。多因素综合考虑得出两种氨基酸的最佳添加量为半胱氨酸14mg/mL,色氨酸0.6mg/mL。这表明半胱氨酸和色氨酸是培养基必须氨基酸,其配比关系到培养基质量。木研究在100L发酵罐水平下,分别从干粉替代基础液和添加半胱氨酸和色氨酸两个方面,得到pH、溶氧、还原糖、产菌量的变化情况,为后期大规模发酵提供可靠数据。这表明实验结果可能应用到工业化生产,产生效益。
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