核糖体展示技术筛选特异性抑制伤寒杆菌侵袭人单核细胞的多肽

来源 :武汉大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mgkmnr
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
两千多种相关的沙门氏菌中,伤寒杆菌是重要的致病菌,它只对人致病并引起伤寒肠热症。伤寒杆菌可侵入肠道细胞,存活于巨噬细胞及树突状细胞。近年来发现的伤寒杆菌病原毒力岛上的IVB型纤毛与伤寒杆菌对人体特异性的致病性密切相关,但新发现的IVB型纤毛与人单核细胞作用的机制还不清楚。为进一步研究伤寒杆菌IVB型纤毛的功能以及研制能特异性抑制伤寒杆菌侵袭人单核细胞的抗菌多肽制剂,本实验在体外人工合成了引物和含36个随机序列的寡核苷酸,通过两轮PCR构建了随机DNA文库,随后在体外进行偶联的转录和翻译,得到含随机12肽的核糖体文库,通过构建的核糖体文库筛选到了与伤寒杆菌IVB型纤毛结构蛋白prePilS结合的12肽R(RQERSSLSKPVV)。侵袭抑制实验结果表明12肽R能抑制有纤毛的伤寒杆菌侵袭人单核细胞系THP-1,而对无纤毛的伤寒杆菌无任何作用,与12肽R大小和溶解性相同的12肽Y(作为对照多肽)对有纤毛和无纤毛的伤寒杆菌侵袭细胞均无抑制作用;等温滴定量热实验(ITC)发现12肽R与prePilS蛋白的Ka值为0.4×105L·mol-1~2.2×105L·mol-1,表明12肽R与prePilS蛋白具有高亲和力。本实验在国际上首次筛选并确定了能特异性结合伤寒杆菌IVB型纤毛的的12肽R,筛选到的12肽R具有抵抗伤寒杆菌感染人体细胞的潜力,本文数据也为进一步理解伤寒杆菌IVB型纤毛的致病机制奠定了基础。
其他文献
使用B.Braun公司Biostat生物反应器和Cytodex微载体,对Vero细胞大规模高密度培养工艺和生物反应器狂犬病毒培养工艺进行初步研究.Vero细胞能在微载体上良好贴壁生长,降低搅拌
学位
目的 采用十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和酶联免疫印迹术(EITB)筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原分子。同时,利用噬菌体随机12肽库技术筛选日本血吸虫感染早期诊
[目的]为明确感染Wolbachia的松毛虫赤眼蜂孤雌产雌品系对亚洲玉米螟的防治效果.[方法]2012和2013连续两年于沈阳地区玉米田间释放松毛虫赤眼蜂孤雌产雌品系和两性生殖品系.[
【目的】 猝死(sudden death, SD)是凡属未能预期的、非创伤的、非自杀性的突然死亡。本文探讨影响SD发生的原因、特点、不明原因死亡的疾病分布、性别、年龄、民族、职别
目的:目前在HCV DNA疫苗研究中B细胞表位的DNA疫苗较多,而针对HCV CTL多表位DNA疫苗国内外尚未见报道.该实验根据HCV J株基因组,人工合成两条核苷酸链,用DNA聚合酶(Taq酶)补
传统双卡双待手机最令人纠结的就是只能指定一张SIM卡联网,另一张SIM卡流量套餐就有浪费之嫌了。而荣耀7,则在软硬件全面升级的基础上,进一步将双卡双待的潜力完全挖掘。产品
目的: 应用超声技术观察不同级别高血压患者颈动脉的结构和血流动力学变化及相互关系。 资料与方法: 将105例原发性高血压按血压水平分为3组,即高血压1级、2级、3级患
一家公司称,精巧的手势会降低对键盘的依赖。    一款新软件承诺,让笔记本用户手不离板就能实现复杂的任务操作。这款名为Scrybe的软件是由位于加州圣克拉拉的Synaptics公司设计的,这家公司已经为市面上70%的笔记本、以及90%的上网本提供了触摸板。目前,该软件仅对数量有限的测试用户开放。  有了Scrybe,用户可以执行各种任务,比如在维基百科上搜索,只需在触摸板上画出预设好的形状即可。用
该课题以大鼠腹腔注射青霉素600万U/Kg制成癫痫模型,然后通过纳米中药2041扶植肠道正常菌群,对实验性大鼠进行抗癫痫治疗.在实验过程中检测肠道菌群中双歧杆菌、乳酸杆菌、肠