【摘 要】
：
目的:通过观察不同时间点肺组织及血清中炎症因子变化,探索HMGB1-TLR4/RAGE信号通路对LPS诱导小鼠ALI炎症进程的影响。方法:将72只SPF级别C57BL/6成年雄性小鼠分为3组。对照组（N组）经鼻滴入PBS缓冲液50ul+30min后小鼠腹膜内注射PBS缓冲液2ml;实验组（LPS组）经鼻滴入LPS溶液（40mg/ml）50 ul+30min后腹膜内注射PBS缓冲液2ml;干预组（L
【基金项目】
：
国家自然科学基金（81960023）；
论文部分内容阅读
目的:通过观察不同时间点肺组织及血清中炎症因子变化,探索HMGB1-TLR4/RAGE信号通路对LPS诱导小鼠ALI炎症进程的影响。方法:将72只SPF级别C57BL/6成年雄性小鼠分为3组。对照组（N组）经鼻滴入PBS缓冲液50ul+30min后小鼠腹膜内注射PBS缓冲液2ml;实验组（LPS组）经鼻滴入LPS溶液（40mg/ml）50 ul+30min后腹膜内注射PBS缓冲液2ml;干预组（LPS+anti-HMGB1抗体组）经鼻滴入LPS（40mg/ml）50 ul+30min后腹膜内注射anti-HMGB1抗体2.5mg/kg。各组实验小鼠于给药后8h、16h、24h和48h四个时间点处死取材。于各时间点观察小鼠一般情况和肺组织标本形态;HE染色观察肺组织病理损伤情况;计算肺组织W/D值;q PCR法检测肺组织NF-κBp65、STAT3的m RNA表达水平;Western Blot测定肺组织TLR4、RAGE和HMGB1蛋白表达水平;ELISA法检测血清IL-1β、MIP-1和HMGB1表达水平。结果:1.小鼠一般情况:N组各时间点小鼠精神可,毛发顺滑、呼吸平稳、口唇红润,饮食正常,抓取小鼠时其逃避动作敏捷。LPS组小鼠出现精神萎靡,毛发竖立、呼吸急促、口唇发绀,饮食较差,抓取小鼠时其逃避动作缓慢,症状随时间延长逐渐加重。与LPS组相比,LPS+anti-HMGB1抗体组小鼠上述情况有所好转。但未恢复正常。2.肺组织大体标本形态:N组小鼠肺组织表面为浅粉色,无明显水肿和出血;LPS组小鼠肺组织明显红肿,表面见散在瘀斑和出血;LPS+anti-HMGB1抗体组小鼠肺组织较红肿,表面亦可见散在瘀斑和出血,但较LPS组减轻。3.肺组织病理损伤:HE染色条件下,N组各时间点小鼠肺组织结构基本完整,几乎未见红细胞、炎症细胞和液体渗出。LPS组各时间点小鼠肺组织不同程度血管充血、出血,大量红细胞和炎症细胞渗出至肺间质和肺泡腔,肺泡壁增粗,部分肺泡壁断裂,肺泡腔融合扩大,随时间延长,肺组织损伤逐渐加重。LPS+anti-HMGB1抗体组各时间点小鼠肺组织损伤程度均较LPS组减轻。4.肺组织W/D值:LPS组、LPS+anti-HMGB1抗体组小鼠各时间点肺组织W/D值都明显高于N组（P<0.05）,随造模时间延长该比值有逐渐增大趋势。LPS+anti-HMGB1抗体组小鼠肺组织W/D值于各时间点均低于LPS组,（P<0.05）。5.q PCR法检测肺组织NF-κBp65、STAT3的m RNA表达水平:LPS组和LPS+anti-HMGB1抗体组肺组织中NF-κBp65、STAT3的m RNA表达水平于8h、16h、24h和48h均高于N组（P<0.05）。经anti-HMGB1抗体干预后肺组织中NF-κBp65、STAT3的m RNA表达水平于8h、16h、24h和48h均较LPS组降低（P<0.05）,但仍高于N组（P<0.05）。6.Western Blot测定TLR4、RAGE和HMGB1蛋白表达水平:与N组相比,LPS组和LPS+anti-HMGB1抗体组TLR4、RAGE和HMGB1蛋白表达于8h、16h、24h和48h均呈不同程度增强（P<0.05）。经anti-HMGB1抗体干预后,小鼠肺组织TLR4、RAGE和HMGB1蛋白表达水平于8h、16h、24h和48h均不同程度低于LPS组（P<0.05）,但仍高于N组（P<0.05）。7.血清IL-1β、MIP-1和HMGB1表达水平:LPS组和LPS+anti-HMGB1抗体组小鼠血清IL-1β、MIP-1和HMGB1各时间点浓度均高于N组（P<0.05）;经anti-HMGB1抗体干预后血清IL-1β、MIP-1和HMGB1各时间点浓度均低于LPS组（P<0.05）,但仍高于N组（P<0.05）。结论:1.在LPS致小鼠ALI炎症过程中,HMGB1-TLR4/RAGE信号通路被激活后,上调了NF-κB-p65和STAT3表达,促进了IL-1β和MIP-1早期炎症因子的释放。2.anti-HMGB1抗体在不同时间和不同程度上通过影响上述相关蛋白表达,一定程度上减轻了肺损伤的严重程度,控制了ALI炎症反应。
其他文献
目的:1)探讨非糜烂性胃食管反流病（nonerosive gastroesophageal reflux disease,NERD）患者食管下括约肌（Lower esophageal sphincter,LES）与正常人LES厚度及压力是否有显著差异性;2)评估食管微量射频治疗（Stretta治疗）NERD疗效;3)明确Stretta治疗是否能增加NERD患者的LES厚度及压力,且LES增厚程度与
目的:通过体外培养原代大鼠支气管成纤维细胞（Rat bronchial fibroblasts,RBFs）,探讨白细胞介素17A（interleukin17A,IL-17A）调控自噬对RBFs增殖、迁移及TGF-β1表达的影响。方法:1.酶联合消化法+组织贴壁法分离和培养原代RBFs;使用免疫荧光鉴定RBFs的标志性波形蛋白证实为支气管成纤维细胞。取生长状态较好的第3～4代RBFs进行实验。2.分
目的:观察人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stromal cells,h AMSCs）移植后对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的急性肺损伤（acute lung injury,ALI）大鼠肺上皮钠离子通道（epithelial Na+channel,ENaC）表达的影响,进一步探讨h AMSCs干预ALI可能的作用机制,从而为AL
目的:磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶/雷帕霉素蛋白（PI3K/AKT/m TOR）信号通路在自噬调控中发挥重要作用,激活PI3K/AKT/m TOR通路可抑制自噬的发生。PI3K/AKT/m TOR通路与高氧诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）自噬的关系尚不清楚,本研究旨在探究微小RNA-21-5p（miR-21-5p）靶向磷酸酶与同源张力蛋白（PTEN）激活PI3K/AKT/m TO
目的:汉化Lee版疲劳-视觉模拟量表（VAS-F）,并在急性胰腺炎人群中检验其信效度和区分度,为急性胰腺炎患者疲劳评估提供可靠工具;用中文版VAS-F调查急性胰腺炎患者的疲劳现状,并探索疲劳程度的影响因素,为临床早期诊断和干预提供科学依据。方法:经正译、回译、文化调适汉化英文Lee版VAS-F为中文版VAS-F。采用目的抽样法,选取2019年11月至2020年12月在贵州省遵义市某三甲医院肝胆外科
目的:探讨慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary disease,COPD）患者外周血C3aR mRNA表达及血清C3a、C3aR、白细胞介素-1β（IL-1β）水平,分析其与COPD患者气道炎症及病情严重程度的相关性,为研究COPD发病机制、寻找潜在的治疗靶点提供新的思路。方法:纳入2020年7月至2021年1月遵义医科大学第三附属医院呼吸内科住院COPD急
目的:探讨IL-17A是否通过调控大鼠支气管成纤维细胞自噬对炎性细胞因子的表达产生影响。方法:1.酶联合消化法+组织块贴壁法培养RBFs,镜下观察第34代形态,免疫荧光法鉴定RBFs标志蛋白波形蛋白。2.本课题组前期实验人员用雷帕霉素诱导RBFs自噬的模型,并用CCK8法检测IL-17A、雷帕霉素最适的作用浓度和时间。IL-17A以20ng/m L 24h为最佳干预浓度及干预时间。雷帕霉素以2nm
统编版中学语文教材中,节选自《水浒传》的课文有《鲁提辖拳打镇关西》《智取生辰纲》《林教头风雪山神庙》。这些故事节奏紧凑、人物生动,为我们展现了一幅幅英雄好汉义薄云天的画面。《水浒传》是一部奇书,它是我国第一部以农民起义为题材的长篇小说,记叙了梁山好汉从起义到兴盛,最终走向失败的全过程。金圣叹这样评价:"《水浒》所叙,叙一百八人,人有其性情,人有其气质,人有其形状,人有其声口。"胡适说过:"重兴水浒
目的:探讨分析AGT基因rs5049多态性及饮酒与居民高血压患病的关系。方法:随机选择2018年3月1日至2018年7月1日的贵州省茅台镇常住居民为研究总体,随机分层抽样抽取300人采集血液标本,其中实际采集的血液标本为261人。根据有无高血压分组,其中高血压组（102人）,无高血压组（159人）。根据有无饮酒分组,其中不饮酒组（34人）,饮酒组（227人）。签署知情同意书后采取上门问卷调查、电话
目的:探讨高迁移率族蛋白-1（high-mobility group box 1,HMGB1）-晚期糖基化终产物受体（advanced glycation end product receptor,RAGE）信号通路在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）中作用及其对ALI进程中AMs M1型极化的影响。方法:80只C