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microRNA在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用。肝细胞癌为最多发的恶性肿瘤之一，存在microRNA表达谱异常。以往研究表明microRNA与已知的肝癌主要相关信号通路相关联，即microRNA的表达异常参与了肝癌的发生发展。另一方面，把microRNA人工导入细胞，可以成功地纠正与microRNA表达下调相关的表型，这也为microRNA用于肝癌的生物治疗提供了重要依据。miR-26a家族包括miR-26a-1和miR-26a-2两个成员。以往研究表明：miR-26a的下调与肝癌的发生存在正相关，并且miR-26a下调的肝癌患者具有较低的生存率。有报道表明，miR-26a能够直接抑制CCND2和CCNE2的表达，进而抑制肝癌细胞的增殖。但在临床实践中，约90％的肿瘤患者死于转移，所以在肝癌中研究miR-26a与转移的关系便变得十分重要。在本研究中，通过生物信息学分析和文献回顾，我们将研究重点放在miR-26a与肝癌细胞转移相关的脱落凋亡的关系上。首先，为研究miR-26a与肝癌细胞脱落凋亡的关系，我们建立了体内外的脱落凋亡模型，并在以上模型中证实过表达miR-26a能够增强肝癌细胞脱落凋亡的敏感性。其次，为明确miR-26a促进肝癌细胞脱落凋亡的分子机制，我们利用荧光素酶报告基因实验、实时定量PCR和Western blot等多种方法证实ITGA5在肝癌中是miR-26a直接调控的靶基因，并且发现干涉ITGA5与过表达miR-26a具有相似的生物学表型，均能够增强肝癌细胞脱落凋亡的敏感性。最后，为充分说明miR-26a与ITGA5在肝癌细胞脱落凋亡中的关系，我们在过表达miR-26a的肝癌细胞中再次过表达ITGA5进行“恢复”实验。利用流式凋亡检测等方法证实，成功过表达ITGA5后肝癌细胞脱落凋亡敏感性降低。综上所述，我们认为在肝癌中存在如下的调控关系，即miR-26a通过直接抑制ITGA5进而增强肝癌细胞的脱落凋亡敏感性。结合文献回顾和我们的研究，肝癌中miR-101和miR-26a均是重要的抑癌microRNA。将其联合使用用于肝癌治疗将起到事半功倍的效果。但在输送的过程中，由于单次输送载量有限，所以当同时输送两种microRNA时，其中每一种microRNA的输送数量便会相对减少，即该microRNA所具备的治疗效果会降低。为保证治疗效果，增强单个双链microRNA分子的功能是十分必要的。在本研究中，我们将两种成熟形式的双链microRNA各取其包含种子区的一半进行拼接，组合成人工设计的“嵌合microRNA”。双荧光素酶报告基因实验证实：一、该嵌合microRNA具有其模拟的任意一种天然microRNA的作用，即：在抑制任意一种组分天然microRNA的靶基因活性方面，嵌合microRNA与天然microRNA具有相似的能力。二、嵌合microRNA具有分别与其等物质的量的两种天然microRNA的加合功能。