目的:胃癌(Gastric cancer,GC)是我国最常见的消化系统恶性肿瘤之一,肿瘤的侵袭转移是导致当前胃癌治疗失败的主要原因。近年来的研究表明,环状RNA(circRNA)在肿瘤的发生和发展过程中起着十分重要的表观遗传学调控作用。然而,circRNA在GC侵袭转移中的作用及其机制尚未完全阐明。本课题通过circRNA表达谱芯片鉴定、RT-qPCR方法验证胃癌组织及血清外泌体中差异表达的circRNA;通过体内外实验研究circRNA对胃癌增殖、侵袭和迁移等细胞生物学行为的影响;并进一步阐明circRNA在胃癌侵袭转移中的作用机制,为基于circRNA的胃癌靶向治疗提供新的理论依据和实验基础。此外,胃癌的准确分期是提高肿瘤治疗效果的重要前提,贯穿于临床诊疗全程,但是当前TNM分期仍存在缺陷。因此,在最后部分,本课题回归临床,揭示circRNA对胃癌患者预后和TNM分期系统的影响,为胃癌个体化治疗和随访提供新的思路和视角。方法:1.采用RNA表达谱芯片鉴定胃癌组织及其对应癌旁组织,胃癌患者术前血清及健康志愿者血清中共同差异表达的circRNA。2.采用RT-qPCR方法验证,根据RT-qPCR结果判断与RNA表达谱芯片的符合情况,进而确定本课题的目标circRNA。3.采用包装circ-RanGAP1的慢病毒感染HGC-27和AGS胃癌细胞株,构建稳定过表达和敲低circ-RanGAP1的胃癌细胞。4.通过CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕实验、Transwell侵袭实验观察稳定过表达和敲低circ-RanGAP1对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。5.通过裸鼠皮下及尾静脉成瘤实验观察circ-RanGAP1对胃癌细胞在体内侵袭迁移的影响。6.采用生物信息学分析并通过FISH实验、双荧光素酶报告基因实验、细胞功能挽救实验确定与circ-RanGAP1结合的miRNA及其下游靶基因,揭示circ-RanGAP1促进胃癌侵袭迁移的分子机制。7.初步探索circ-RanGAP1可能通过外泌体介导,进一步促进胃癌侵袭迁移。8.揭示circ-RanGAP1表达水平对胃癌患者预后的影响,以及探讨联合circ-RanGAP1的TNM分期能否提高对胃癌患者预后预测的准确性。结果:1.环状RNA circ-RanGAP1在胃癌组织中表达较癌旁组织表达显著上调,同时,在胃癌患者术前血清外泌体表达较健康志愿者也显著表达上调。2.细胞体外功能实验结果显示,与阴性对照组相比,过表达circ-RanGAP1后,胃癌细胞的侵袭和迁移能力均显著提高;而circ-RanGAP1敲低后,胃癌细胞的侵袭和迁移能力均被显著抑制。体内移植瘤实验显示,过表达circ-RanGAP1的胃癌细胞皮下成瘤能力显著高于对照组;circ-RanGAP1敲低后,胃癌细胞皮下成瘤能力显著低于对照组;circ-RanGAP1敲低后,显著抑制胃癌细胞肺转移瘤的成瘤能力。4.生物信息学分析、FISH实验及双荧光素酶报告基因实验发现circ-RanGAP1可与miR-877-3p互补结合,而miR-877-3p的下游靶基因为VEGFA。5.进一步功能挽救实验验证circ-RanGAP1可以与miR-877-3p直接结合,并通过miR-877-3p/VEGFA信号轴促进胃癌细胞的侵袭迁移。6.与敲低circ-RanGAP1的胃癌细胞株上清共培养后,胃癌细胞侵袭能力显著减弱;与过表达circ-RanGAP1的胃癌细胞株上清共培养后,胃癌细胞侵袭能力显著增强。7.胃癌组织中circ-RanGAP1高表达是胃癌患者不良预后的独立危险因素,联合circ-RanGAP1后能显著提高胃癌TNM分期系统预后预测的准确性。结论:1.环状RNA circ-RanGAP1在胃癌组织和胃癌病人术前血清外泌体中表达均显著上调。2.环状RNA circ-RanGAP1能显著促进胃癌细胞的侵袭和迁移能力。3.环状RNA circ-RanGAP1能与miR-877-3p互补结合,解除miR-877-3p对下游靶基因VEGFA抑制,进而VEGFA表达上调,最终促进胃癌侵袭迁移。4.环状RNA circ-RanGAP1可能通过外泌体介导,进一步提高胃癌细胞的侵袭、迁移能力。5.环状RNA circ-RanGAP1高表达是胃癌患者预后不良的独立危险因素,联合circ-RanGAP1能显著提高胃癌TNM分期的准确性。