拟南芥AtMAP4Ks属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族。AtMAP4K家族有10个成员，即:AtMAP4K1-10。它们的N末端是保守的激酶结构域，C端是二聚化结构域。它们包含一个共同的序列基序:TFVGTPxWMAPEV。拟南芥AtMAP4Kα2在哺乳动物中的同源蛋白是MST4。AtMAP4Kα2与MST4的序列同源性高达63％。MST4是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族中GCKⅢ亚家族成员之一，而GCKⅢ家族在拟南芥中的同源蛋白只有一个成员，即AtMAP4Kα2，因此，AtMAP4Kα2也称AtGCKⅢ。GCKⅢ激酶广泛参与细胞的生长、凋亡、细胞极化等重要生理活动。拟南芥AtMO25在哺乳动物的同源蛋白是MO25。它们的序列同源性高达44％。拟南芥AtMO25的名字由此而来。哺乳动物中的MO25是一个脚手架蛋白，作为GCKⅢ亚家族蛋白的接头蛋白促进其激酶活性。　　前人通过结构生物学的方法，解析了哺乳动物MST4与MO25复合体的三维结晶结构，揭示了MO25激活MST4的分子机制，即:MO25通过介导MST4形成二聚体，从而MST4发生交互自磷酸化而被激活。　　本研究结果如下:　　1、TEV酶的纯化。AtMAP4Kα2、AtMO25与标签连接处含有TEV酶切位点，因此，TEV酶可用于AtMAP4Kα2、AtMO25标签的去除。　　2、AtMAP4Kα2的克隆、表达、纯化及初步晶体学研究。首先构建了AtMAP4Kα2的3个克隆片段，包括AtMAP4Kα2全长（1-690aa）、AtMAP4Kα2激酶结构域(1-290αa)和AtMAP4Kα2激酶结构域及WEF基序(1-338aa)。着重纯化并结晶了AtMAP4Kα2激酶结构域。最终获得AtMAP4Kα2激酶结构域的晶体衍射数据。AtMAP4Kα2激酶结构域的衍射分辨率为1.9(A)，属于空间群C2221，晶胞参数为a=55.27，b=82.93，c=133.15(A)。　　3、AtMO25的克隆、表达、纯化及初步晶体学研究。首先克隆了AtMO25全长;然后在16℃、0.4 mM IPTG下诱导表达，并通过镍离子亲和层析、分子排阻层析，纯化了AtMO25全长。最后，对AtMO25全长进行了晶体的初筛。