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子宫内膜癌是欧美国家最常见的女性恶性肿瘤。在我国,子宫内膜癌是仅次于宫颈癌的三大妇科恶性肿瘤之一。近年来,子宫内膜癌的发病有逐渐年轻化的趋势。本课题组前期研究表明,低脂联素水平是子宫内膜癌发病的独立危险因素。子宫内膜腺癌组织中AdipoR1阳性表达率明显低于正常内膜组,AdipoR2表达率明显低于正常内膜组。在子宫内膜腺癌组织中,AdipoR1的低表达与FIGO分期、病理分级、肌层浸润深度、淋巴结转移、淋巴脉管受累显著相关;AdipoR2的低表达与组织分化程度显著相关。为了进一步研究脂联素与子宫内膜癌的相关性,本实验采取两种不同的子宫内膜癌细胞株,检测脂联素以及通路抑制剂作用子宫内膜癌细胞后,AMPK信号传导通路中不同信号分子的变化,凋亡相关蛋白Bcl-2、基质金属蛋白酶MMP-9的表达,以及脂联素对细胞生长、增殖能力、迁移能力、凋亡率的影响,从而进一步明确脂联素对子宫内膜癌细胞产生影响的具体作用机制。目的:研究不同浓度脂联素对子宫内膜癌HEC-1B和RL95-2细胞增殖能力的影响,并探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路的作用机制,凋亡相关蛋白Bcl-2、基质金属蛋白酶MMP-9的变化;以及脂联素对子宫内膜癌细胞迁移、凋亡能力的影响。方法:采用不同浓度的脂联素以及通路抑制剂作用于子宫内膜癌HEC-1B和RL95-2细胞,检测两种细胞的增殖能力;用0ug/ml脂联素(空白对照组)、20ug/ml脂联素(APN组)、AMPK通路抑制剂复合物C(复合物C组)、复合物C+20ug/ml脂联素(复合物C+APN组)作用30min后,用RT-PCR法检测Bcl-2、MMP-9基因的表达水平;Western Blot法检测AdipoR1、AdipoR2的表达;Western blot法检测AMPK通路相关蛋白的表达,凋亡相关蛋白Bcl-2、基质金属蛋白酶MMP-9的表达。Transwell法检测两株细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:(1)脂联素浓度>5ug/ml即可明显抑制对人子宫内膜癌细胞增殖,并且呈浓度依赖性(P<0.05)。(2)两株细胞中均可检测到AdipoR1、AdipoR2的表达。AdipoR1的蛋白表达均高于AdipoR2,差异有统计学意义(p<0.05)。(3)20ug/ml脂联素作用两株细胞30min后,均可诱导AMPK磷酸化,进而抑制mTOR、4EBP1磷酸化(P<0.05),而对相应总蛋白无影响;Bcl-2、MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05)。AMPK通路抑制剂复合物C可抑制上述蛋白的磷酸化(P<0.05),阻断Bcl-2、MMP-9基因和蛋白受抑(P<0.05)。(4)脂联素组与空白组相比,细胞凋亡率增加(P<0.05),迁移细胞数减少(P<0.05)。AMPK通路抑制剂复合物C可阻断上述效应(P<0.05)。结论:脂联素可通过AMPK信号通路抑制子宫内膜癌细胞增殖;抑制子宫内膜癌细胞迁移、诱导其凋亡