土霉素（OTC）作为四环素类兽药，由于其抗菌谱广，价格低廉，疗效好等优点，被广泛应用于预防和治疗动物疾病等方面，同时土霉素对于动物的生长发育也有一定的促进作用，因而常常作为饲料添加剂在饲料中大量添加，但是如果不正确使用，不遵守休药期的规定，就会在动物体内残留，一旦人食用这类动物性食品后，在食物链作用下就会进入人体并不断富集，积累到一定量时，就会对人类健康造成危害。因此，开展并加强对动物性食品中土霉素的残留检测是十分必要的。目前，世界上许多国家对动物性食品中的四环素类药物都有最高残留限量(MRL)的规定，一些国家甚至规定不得检出四环素类药物。检测土霉素的传统方法如毛细管电泳、超临界流体色谱、色谱检测法、紫外-可见光分光度法等需要大型的昂贵的分析仪器，不适合用于现场检测，且检测费用较高，检测过程繁琐，检测所需的时间长，难以对动物性食品进行快速、现场检测。免疫学检测技术则弥补了常规检测的缺点，其检测过程简便，检测的时间短，成本低，且检测所需的仪器轻便，可带到现场进行检验。如要建立土霉素快速免疫检测方法，则抗土霉素的特异性单克隆抗体的制备是其必要条件。本研究的目的在于制备OTC人工抗原，用人工抗原免疫小鼠，通过细胞融合获得能够分泌抗土霉素的特异性单克隆抗体的细胞株，为建立起免疫学快速检测方法提供基础。本研究用BSA（牛血清白蛋白）、OVA（卵清白蛋白）作为载体蛋白，采用碳二亚胺法将载体蛋白分别与土霉素偶联，成功制备了土霉素的人工抗原。用紫外分光光度法对人工抗原检测，人工抗原BSA-OTC的吸收峰相对于OTC、BSA的吸收峰均发生偏移，OVA-OTC的吸收峰相对于OVA、OTC的吸收峰发生了峰的叠加；用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对人工抗原检测，人工抗原相对于各自的偶联蛋白迁移速率均较慢；显色反应表明人工抗原中含有OTC特有的酚羟基，进行了鉴定，证明人工抗原偶联成功。本研究利用制备出的人工抗原BSA-OTC免疫BALB/c小鼠，成功获得了针对土霉素的特异性抗体，用50%聚乙二醇将脾细胞与骨髓瘤细胞的融合，经过克隆三次后，细胞株的阳性率均能达到100%。通过用分泌抗土霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞的上清液对几种抗生素进行交叉反应率测定，证明制备的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有较高的特异性。