球孢白僵菌对二斑叶螨的致病性及对智利小植绥螨的亚致死影响

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二斑叶螨Tetranychus urtice Koch是世界性害螨,随着传统农药的大量使用,二斑叶螨的抗药性日益增强。因此,利用生物防治手段控制二斑叶螨得到了迅速发展。球孢白僵菌是重要的广谱性昆虫病原真菌,对二斑叶螨具有较高的致病力。捕食性智利小植绥螨是二斑叶螨的专食性天敌,对二斑叶螨种群具有较好的抑制作用。并且球孢白僵菌与智利小植绥螨的联合应用能更有效的防治二斑叶螨。但由于球孢白僵菌是广谱性的昆虫病原真菌,因此,其对捕食螨也有潜在的致病风险。例如,在球孢白僵菌和捕食螨联合应用时,球孢白僵菌可能会通过侵染二斑叶螨而对捕食螨产生间接影响。基于该假设,本论文测定了不同浓度的球孢白僵菌对二斑叶螨的致病力,并用扫描电镜观察了球孢白僵菌侵染二斑叶螨的致病过程;测定球孢白僵菌侵染的二斑叶螨对智利小植绥螨的发育历期和繁殖力的影响,分析球孢白僵菌对智利小植绥螨的亚致死影响;测定复壮后的三个世代的球孢白僵菌孢子粉中的代谢物成分,分析连续世代白僵菌代谢物差异。具体研究结果如下:1、球孢白僵菌对二斑叶螨的致病力二斑叶螨被不同浓度的球孢白僵菌侵染后,其死亡率随着球孢白僵菌浓度的升高而逐渐增加。在1×10~8个/mL浓度下,校正死亡率最高为83.8%,致死中时为5.0 d。致死中浓度为1.37×10~6个/mL。利用扫描电镜观察球孢白僵菌对二斑叶螨侵染过程,发现球孢白僵菌能在60 h内完成孢子附着、形成芽管、产生侵染结构,穿透表皮并成功侵入虫体。2、球孢白僵菌对智利小植绥螨的亚致死作用利用喷施球孢白僵菌16 h、24 h、36 h和48 h后的二斑叶螨饲喂智利小植绥螨,分析智利小植绥螨的死亡率、发育历期及产卵量变化。结果显示,取食不同处理的智利小植绥螨死亡率均低于2.0%。在F0代中,与对照相比,48 h处理下智利小植绥螨卵历期、第二若螨历期和产卵前发育历期延长,整个世代历期也随之延长;36 h处理下第二若螨历期和产卵前发育历期延长;24 h处理下产卵前发育历期延长,其他处理与对照均无显著差异。在F1代中,与对照相比,不同处理的智利小植绥螨各个虫态的发育历期及整个世代发育历期无明显差异。智利小植绥螨F0代的单雌产卵量在36 h和48 h处理下显著低于对照,F1代的各处理单雌产卵量与对照均无显著差异。3、球孢白僵菌孢子粉的次生代谢产物分析对继代培养的球孢白僵菌孢子粉次生代谢产物进行LC-MS检测。在F0代中有49种次生代谢产物;F1代中有28种次生代谢产物;F2代中有68种次生代谢产物。并且有18种球孢白僵菌孢子粉次生代谢产物在F0代、F1代和F2代中都含有。同时测得三个连续世代的球孢白僵菌孢子粉中都含有白僵素。表明不同世代球孢白僵菌孢子粉的次生代谢产物种类有明显差别,但不同世代间均含有部分相同的次生代谢物。本研究评估了球孢白僵菌对二斑叶螨的致病性及对智利小植绥螨的亚致死影响。结果表明球孢白僵菌对二斑叶螨具有较高的致病力,但对智利小植绥螨的亚致死影响较小。因此,将球孢白僵菌与智利小植绥螨联合防治二斑叶螨是可行的。通过对球孢白僵菌孢子粉次生代谢产物进行测定,发现经过继代培养,不同世代间次生代谢物存在差异,但均含有白僵菌素。总之,该研究结果为球孢白僵菌与智利小植绥螨联合防治二斑叶螨提供了理论基础。
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