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目的:探讨黏蛋白13(Mucin13,MUC13)对人喉鳞癌细胞增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭能力等生物学行为的影响,分析MUC13在喉癌组织中的表达情况及临床意义。方法:1.以人喉鳞癌细胞为模板细胞,筛选MUC13的小干扰RNA序列(Small Interfering RNA,SiRNA)序列,进而得到特异性 MUC13-RNAi(RNA interference),将该序列包装入慢病毒并转染人喉鳞癌细胞株TU177,特异性阻低MUC13的表达。通过荧光定量PCR(q-PCR)、免疫印迹法(Western blotting)、免疫荧光等方法验证MUC13表达阻低有效性。利用CCK-8法、平板克隆实验、Transwell小室迁移实验和流式细胞术观察MUC13对人喉鳞癌细胞TU177的增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭能力的影响。2.收集2016年6月-2020年4月间在川北医学院耳鼻咽喉头颈外科手术治疗的喉癌患者喉癌组织标本93例、癌旁组织标本49例、其他手术患者上皮内瘤变组织标本19例及声带息肉组织标本39例。采用免疫组织化学染色法检查四种组织中MUC13蛋白的表达情况。收集以上喉癌患者同期临床资料,分析喉癌组织中MUC13的表达情况与喉癌患者临床病理因素的关系,并分析喉癌患者预后影响因素。3.上述免疫组化实验数据均应用统计软件IBM SPSS Statistics 25进行统计分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.用慢病毒转染技术,特异性阻低人喉鳞癌细胞TU177中MUC13的表达后,对人喉鳞癌细胞TU177的增殖、周期、凋亡行为、迁移、及侵袭能力产生了影响。与未经转染的空白对照组(Blank)TU177细胞及无意义序列转染的阴性对照组(NC)TU177细胞相比,MUC13表达阻低的MUC13-RNAi组TU177细胞CCK-8测试OD值随培养时间延长的增长率下降;NC组较Blank组TU177细胞相对克隆形成率为78.9%,MUC13-RNAi组较Blank组TU177细胞相对克隆形成率为54.1%,MUC13-RNAi组TU177细胞相对克隆形成率显著下降(P<0.05);迁移实验中,NC组与Blank组相较喉癌细胞相对迁移率为94.5%,差异无统计学意义(P>0.05);MUC13-RNAi组与Blank组相比TU177细胞相对迁移率为53.2%,MUC13-RNAi组与NC组相比TU177细胞相对迁移率为56.3%,差异均有统计学意义(P<0.05),MUC13-RNAi组TU177细胞迁移能力显著下降;侵袭实验中,NC组与Blank组比较喉癌细胞相对迁移率为95.2%,差异无统计学意义(P>0.05),MUC13-RNAi组与Blank组相比喉癌细胞相对迁移率为65.9%,MIUC13-RNAi组与Blank组相比喉癌细胞相对迁移率为69.2%,差异均有统计学意义(P<0.05),MUC13-RNAi组TU177细胞侵袭能力显著下降;同时MUC13-RNAi组TU177细胞发生G1期阻滞及早期凋亡倾向增加,表明MUC13-RNAi组TU177细胞增殖能力下降,与CCK-8及细胞克隆形成实验的结果一致。2.MUC13免疫组化染色结果显示喉癌组织平均IOD值0.0445 ±0.0254,喉上皮内瘤变组织平均IOD值0.0214±0.0155,癌旁组织平均IOD值0.0095±0.0107,声带息肉组织平均IOD值0.0069±0.0085.可见从正常喉黏膜鳞状上皮、喉良性病变到喉鳞状上皮内瘤变进而发展到喉鳞状细胞癌的过程中MUC13的表达呈上升趋势。喉癌组织中MUC13表达水平与患者性别、年龄、肿瘤部位及有无淋巴结转移无明显关系,差异无统计学差异(P>0.05)。与患者的T分期、临床分期和分化程度有明显关系,高分化(IOD 0.0513±0.0242)、T3~4期(IOD 0.0539±0.0268)和临床分期Ⅲ-Ⅳ(IOD 0.0518±0.02728)的喉癌患者喉癌组织中MUC13表达量高于中低分化(IOD 0.0372±0.0246)、T1~2(IOD 0.0395±0.0232)和临床分期Ⅰ-Ⅱ 期(IOD 0.0401±0.0232),差异均有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线提示MUC13表达量大于等于均值患者的生存时间明显低于MUC13表达量小于均值患者,且差异具有统计学意义(P<0.05)。声门上下型、临床分期越高、T分级越高、有淋巴结转移及MUC13表达含量高为影响喉癌患者生存时间的危险因素,但Cox回归分析中,上述5个因素的显著性P值均大于0.05,故不能判定为影响喉癌患者生存时间的独立危险因素。结论:1.特异性阻低MUC13在喉鳞癌细胞系TU177中的表达后,细胞的增殖能力下降、增殖及迁移能力下降、细胞稍有G1阻滞并且凋亡倾向增加,这表明MUC13参与调控了喉鳞癌细胞的多种生物学行为;2.MUC13在声带息肉组织和癌旁组织、喉鳞状上皮内瘤变组织、癌组织中的表达正常中的表达量依次增高,且随着临床分期升高而升高,在高分化喉鳞癌组织中的表达高于中低分化组织,说明MUC13与喉鳞癌的发生发展有关。MUC13对于喉鳞癌的预后预测有一定的参考意义,但其在喉鳞癌中作用的机制尚需进一步的研究。