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目的:探讨凉血通瘀方调节脑出血大鼠肠道菌群代谢产物SCFAs发挥抗炎作用的机制。方法:采用改良自体血注入法建立脑出血大鼠模型,造模成功后,随机分为假手术组、模型组、凉血通瘀组、益生菌组,于ld、3d、5d三个时间点观察。从行为学、脑组织含水量方面观察凉血通瘀方对脑出血大鼠脑损害指标的影响;病理形态学观察脑组织炎症反应情况,免疫组化法检测脑组织NF-κB表达,RT-PCR测定脑组织IL-1β、TNF-αmRNA表达,研究凉血通瘀方对炎性因子的影响;气相色谱-质谱联用分析(GC-MS)测定脑出血大鼠粪便SCFAs,解析凉血通瘀方对脑出血大鼠肠道菌群代谢产物的影响;RT-PCR测定脑、肠组织GPR43 mRNA的表达变化,ELISA测定脑组织、肠组织HDAC6含量,阐明凉血通瘀方调节脑出血大鼠肠道菌群代谢产物SCFAs发挥抗炎作用的机制。结果:1(1)行为学评分:凉血通瘀组3、5d和益生菌组5d行为学评分(Longa评分)较模型组降低(P<0.05),凉血通瘀方和益生菌制剂可改善脑出血大鼠神经功能障碍。(2)脑组织含水量:凉血通瘀组3、5d和益生菌组5d脑组织含水量明显低于模型组(P<0.01,P<0.05),凉血通瘀方和益生菌制剂可降低脑组织含水量,减轻脑水肿。2(1)脑组织炎症反应观察:与假手术组相比,模型组炎性细胞浸润增加;与模型组比较,凉血通瘀组和益生菌组炎性细胞浸润减少,可见凉血通瘀方、益生菌制剂可减轻脑组织炎性反应,发挥抗炎作用。(2)脑组织NF-κB表达:各时间点凉血通瘀组和益生菌组NF-κB阳性细胞数低于模型组(P<0.05,P<0.01),说明凉血通瘀方和益生菌制剂可降低NF-κB表达,拮抗脑出血后炎性反应。(3)脑组织TNF-α、IL-1β mRNA表达:凉血通瘀组在造模后各时间点TNF-α mRNA表达低于模型组(P<0.05,P<0.01),益生菌组3、5d TNF-αmRNA表达较模型组降低(P<0.05);凉血通瘀组和益生菌组在各时间点IL-1β mRNA表达较模型组均降低(P<0.05,P<0.01),说明可降低TNF-α、IL-1β mRNA表达,发挥抗炎作用。3(1)粪便中乙酸含量比:各组大鼠1、3d乙酸含量比无显著差异,模型组5d粪便中乙酸含量比明显高于假手术组和凉血通瘀组(P<0.05,P<0.01),揭示凉血通瘀方可降低粪便中乙酸含量比。(2)粪便中丙酸含量比:各组大鼠1、3d丙酸含量比无统计学意义,凉血通瘀组5d粪便中丙酸含量比明显高于模型组(P<0.05),揭示凉血通瘀方可提高粪便中丙酸含量比。(3)粪便中丁酸含量比:各组大鼠1、3d丁酸含量比无统计学意义,模型组5d粪便中丁酸含量比显著低于假手术组(P<0.05),凉血通瘀组、益生菌组与假手术组无差异(P>0.05),说明脑出血后粪便丁酸含量比降低,凉血通瘀方可恢复粪便丁酸含量比。(4)各组大鼠粪便中乙酸、丙酸、丁酸含量比(D5):模型组粪便中乙酸含量比明显高于假手术组和凉血通瘀组(P<0.05,P<0.1);凉血通瘀组粪便中丙酸含量比明显高于模型组(P<0.05);模型组粪便中丁酸含量比显著低于假手术组(P<0.05),说明凉血通瘀方可降低粪便中乙酸含量比,提高丙酸含量比,恢复丁酸含量比。4(1)脑组织GPR43mRNA表达:各组大鼠1d GPR43mRNA表达量无统计学意义,凉血通瘀组3、5d和益生菌组5d GPR43mRNA表达量明显高于模型组(P<0.01),揭示凉血通瘀方和益生菌制剂可增加脑组织GPR43mRNA表达。(2)肠组织GPR43mRNA表达:各组大鼠1d GPR43mRNA表达量无统计学意义,凉血通瘀组和益生菌组3、5dGPR43mRNA表达量明显高于模型组(P<0.01),揭示凉血通瘀方和益生菌制剂可增加肠组织GPR43mRNA表达。(3)脑组织HDAC6表达:各个时间点凉血通瘀组HDAC6含量低于模型组(P<0.01),益生菌组3、5d HDAC6含量低于模型组(P<0.01),凉血通瘀方和益生菌制剂可降低脑组织HDAC6表达。(4)肠组织HDAC6表达:凉血通瘀组3、5d HDAC6含量低于模型组(P<0.01),各个时间点益生菌组组HDAC6含量低于模型组(P<0.01,P<0.05),凉血通瘀方和益生菌制剂可降低肠组织HDAC6表达。结论:凉血通瘀方可抑制NF-κB、TNF-α、IL-1β等炎性因子水平表达,减轻脑出血炎性反应,从而减轻脑出血大鼠脑水肿,改善脑出血大鼠的神经功能;凉血通瘀方可降低粪便中乙酸含量比,提高丙酸含量比,恢复丁酸含量比;凉血通瘀方通过增加GPR43表达,降低HDAC6表达,抑制脑组织炎性反应,发挥抗炎作用。