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目的通过观察辛伐他对钛颗粒刺激人单个核细胞释放肿瘤坏死因子、单核细胞趋化蛋白及其对破骨细胞形成的影响,分析该过程中辛伐他汀对磷酸化p42/p44激酶表达的影响,评价辛伐他汀在防治人工关节无菌性松动中的作用。方法抽取成年健康志愿者外周血45ml,分层液梯度离心法分离获得外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),制成密度为5×108个/ mL的细胞悬液,根据干预试剂不同随机分为5组。A组:PBMC+钛颗粒组;B、C、D、E组在A组的基础上分别加入浓度为1×10-5、1×10-6、1×10-7mmol/L的辛伐他汀及20μmol/L的U0126。取培养24 h后上清液检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量。分别于培养10、18 d后进行TRAP染色阳性细胞计数,采用扫描电镜检测骨磨片的吸收陷窝,观察辛伐他汀对钛颗粒诱导单核细形成破骨细胞的影响。取培养2小时的单核细胞,分组同前,用辛伐他汀及20μmol/L U0126干预60 min后,再用0.01%钛颗粒悬液分别刺激培养60 min,采用Western blot检测细胞外信号调节激酶(Extracellular signal regulated-kinases,ERK1/2)的表达水平。初步讨论MAPK通路在人工关节无菌性松动中作用。结果培养第3天,单核细胞逐渐变大,9天时有破骨细胞及其前体细胞形成,呈圆形,但破骨细胞体积较小,核较少;18天时破骨细胞形状不规则,体积增大,胞核明显增多;辛伐他汀明显抑制单核细胞向破骨细胞的分化。SEM结果:检查发现骨磨片上有吸收陷窝形成,骨吸收陷窝边缘整齐,底部不平;A、B、C、D、E组TNF-αOD值分别为1.1155±0.2436,0.6936±0.3543 ;0.6957±0.3873;0.71638±0.4789 ; 0.2635±0.1016 ; MCP-1 OD值分别为1.4210±0.1053 ;0.9151±0.4113;1.0035±0.4642;1.102±0.3539;0.2713±0.1451;A组与其他组细胞因子比较,差异有统计学意义(P<0.05);E与B、C、D、组比较有统计学差异(P<0.05),B、C、D组间有统计学差异(P<0.05)。刺激培养30 min时A、B、C、D、E组ERK1/2开始表达,含量很低; 60 min时A、B、C、D、E组ERK1/2含量分别为1.6121±0.0682、1.0781±0.0728、1.2687±0.2231、1.4397±0.1801、0.7320±0.1104,组间比较差异均有统计学意义(P < 0.05)。结论钛颗粒诱导人单核细胞释放大量的TNF-α、MCP-1,ERK1/2通路是磨屑诱导巨噬细胞生成T NF-α和MCP-1的主要通路,辛伐他汀可通过ERK1/2通路抑制TNF-α、MCP-1的释放,使形成破骨细胞的数量明显减少,有效防止磨屑诱导的骨溶解,有望成为防治人工关节无菌性松动的药物。